兩種紅豆杉植物愈傷組織培養(yǎng)、褐化抑制及紫杉醇含量檢測(cè).pdf

1、曼地亞紅豆杉(Taxusmedia)和南方紅豆杉(Taxuschinensisvar．marei)都是提取抗癌藥品紫杉醇的重要來(lái)源，同時(shí)也是優(yōu)秀的園林綠化樹(shù)種，其中南方紅豆杉是我國(guó)特有物種。目前，針對(duì)這兩種植物的組織培養(yǎng)研究還相對(duì)薄弱。本文選取曼地亞紅豆杉和南方紅豆杉植株，對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)條件進(jìn)行研究，對(duì)組織培養(yǎng)中的褐化抑制方法進(jìn)行了探討，并對(duì)枝葉中紫杉醇含量進(jìn)行了測(cè)定和比較，提出了較為完整的曼地亞紅豆杉和南方紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)、

2、培養(yǎng)和褐化抑制技術(shù)體系，并以此為基礎(chǔ)，對(duì)兩種紅豆杉組織培養(yǎng)研究主要問(wèn)題和前景進(jìn)行了探討和展望。 基于DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)框架的均勻設(shè)計(jì)，本文首先對(duì)兩種紅豆杉的愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)進(jìn)行了研究，重點(diǎn)是對(duì)莖和葉外植體的誘導(dǎo)能力分析比較、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的選取、濃度配比優(yōu)化；對(duì)兩種紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)能力從三個(gè)方面進(jìn)行了對(duì)比研究。結(jié)果表明：兩種紅豆杉用于愈傷組織誘導(dǎo)的最佳外植體均為莖；B5+NAA2．9mg／L+6-BA0．3

3、mg／L最適合曼地亞紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)，B5+NAA1．7mg／L+6-BAO．1mg／L最適合南方紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)；南方紅豆杉外植體成愈時(shí)間較曼地亞紅豆杉小、愈傷組織直徑較曼地亞紅豆杉大，曼地亞紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)率較南方紅豆杉高，整體來(lái)看，南方紅豆杉更易于進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)。 其次，本文對(duì)利用植物材料避光處理、向培養(yǎng)基中添加活性炭、抗壞血酸以及上述方法復(fù)合使用抑制兩種紅豆杉愈傷組織培養(yǎng)不同階段中產(chǎn)生的褐化現(xiàn)象

4、進(jìn)行了探討。結(jié)果表明：在愈傷組織誘導(dǎo)階段，植物材料避光處理、向培養(yǎng)基中添加活性炭和抗壞血酸都能對(duì)愈傷組織褐化起到不同程度的抑制作用，而添加抗壞血酸0.1g／L時(shí)對(duì)兩種紅豆杉褐化抑制效果均最佳；在愈傷組織增殖階段，向培養(yǎng)基中添加抗壞血酸能有效的對(duì)褐化起到抑制作用，濃度為0．01-O.1g／L時(shí)對(duì)曼地亞紅豆杉效果最佳，濃度為0.01-0.2g／L時(shí)對(duì)南方紅豆杉效果最佳。 最后，本文對(duì)兩種紅豆杉枝葉中紫杉醇含量進(jìn)行了檢測(cè)和對(duì)比。結(jié)果表