紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)中紫杉醇代謝調(diào)節(jié)機(jī)理的研究.pdf

1、紫杉醇是一種四環(huán)二萜酰胺類化合物,1992年底被美國(guó)FDA認(rèn)證作為抗癌藥物上市.它廣泛存在于紅豆杉科紅豆杉屬植物中,但含量較低,并常與無(wú)抗癌活性的紫杉烷類物質(zhì)相伴而生.該研究分別利用HPLC法和TLC-紫外分光光度法分離純化并檢測(cè)紫杉醇,均取得了較好效果,兩種方法具有各自的應(yīng)用特點(diǎn),前者適于精確定量,而后者可多用于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)粗略檢測(cè).為了更好地了解細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝特點(diǎn),該實(shí)驗(yàn)同時(shí)使用幾種代謝水平不同的細(xì)胞進(jìn)行比較研究.通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的

2、激素濃度與組合來(lái)改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀況,發(fā)現(xiàn)不同人細(xì)胞株對(duì)同一培養(yǎng)條件反應(yīng)各不相同.實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞生長(zhǎng)周期中,三種細(xì)胞株的生長(zhǎng)與紫杉醇積累之間具有負(fù)相關(guān)的特性.在細(xì)胞生長(zhǎng)前期,紫杉醇產(chǎn)量始終保持較高水平;而當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)率達(dá)到最高點(diǎn)時(shí),產(chǎn)量迅速降到最低點(diǎn),甚至為零;隨生長(zhǎng)率的下降,紫杉醇量又有所回升.在兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程中,定期取樣,分別檢測(cè)細(xì)胞和培養(yǎng)基中的紫杉醇類物質(zhì)積累狀史,結(jié)果表明紫杉醇積累的同時(shí),baccatin-Ⅲ也有一定積累,且