紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇生長體系的優(yōu)化.pdf

1、9J北帥范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2001年碩f:學(xué)位論文摘要杉醇可以在細(xì)胞分裂過程中促進(jìn)微管蛋白聚合并且抑制其解聚，成霖黯默篡纂促進(jìn)微管蛋!L腺癌的治療，是一種很有發(fā)展前途的抗癌新藥。目前臨床所需紫杉醇均來自紅豆杉植物的樹皮中，由于資源限制使得藥源緊張。各國科研工作者紛紛從多種途徑尋找獲得紫杉醇的方法，其中植物細(xì)胞培養(yǎng)法成為大家研究的焦點(diǎn)。但是由于紅豆衫細(xì)胞生長緩慢、代謝水平低下，使紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展受到WN力根據(jù)紅豆杉細(xì)胞

2、的生長與代謝的非偶聯(lián)性，采用兩步法培養(yǎng)技術(shù)，使紅豆杉細(xì)胞首先實(shí)現(xiàn)快速穩(wěn)定增殖，然后采取代謝恢復(fù)手段，最終達(dá)到細(xì)胞快速增殖和高代謝水平的目的。本文針對紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇過程中，影響細(xì)胞生長的若干因素進(jìn)行了研究合要實(shí)驗(yàn)結(jié)論如下:1通過對BsMSTASH四種培養(yǎng)基的大量元素、微量元素、鐵源及維生素進(jìn)行比較，B。培養(yǎng)基為有利于細(xì)胞生長的基本培養(yǎng)基。2通過對NAA和6BA以及24D和6BA組合篩選，NAA8.OmgL和6BA0.5mgL為對

3、細(xì)胞生長有利的激素組合。3通過對蔗糖濃度篩選，發(fā)現(xiàn)20gL蔗糖對細(xì)胞生長有促進(jìn)作用:通過對此濃度的蔗糖水解產(chǎn)物進(jìn)行組合和篩選，果搪能有效促進(jìn)細(xì)胞的鮮重增長通過對20gL的蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖添加實(shí)驗(yàn)，果糖和半乳糖都能有效促進(jìn)細(xì)胞的生長。但是在添加果糖的培養(yǎng)基上細(xì)胞生長過程中發(fā)生褐變。4對于培養(yǎng)基中總氮含量及NH`N0比例進(jìn)行調(diào)節(jié)發(fā)現(xiàn)，調(diào)節(jié)氮NH7NO一比例可以改善細(xì)胞的生長，其中NHN0=4.522.5時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)較好。5在BS

4、培養(yǎng)基中添加氨基酸發(fā)現(xiàn)，AspArgGly能有效促進(jìn)細(xì)胞的生長，但是三種氨基酸的組合并沒有起到比單一的氨基酸更有效的作用。6對培養(yǎng)基pH在4.56.0范圍內(nèi)進(jìn)行了調(diào)節(jié)，pH變化對細(xì)胞的生河北師范人學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2001年碩:學(xué)位論文AbastractTaxolcouldpromotetheassemblyofmicrotublesandrestrainthedepolymerization.Itisanefectiveanticance

5、ragent.Andnowithasbeensuccessfullyusedinthetreatmentofrefractoryovariancancer.andmetastaticbreastcancer.Taxolhasbeenrecognizedasmostpromisinganticancerdrug.Presentlythetaxolusedintheclinicaltrialandtreatmentisisolatedfro

6、mthebarkofTaxustrees.Forthescarcityofthetreeandthelowyieldsoftaxolthesupplyoftaxolisrestricted.Interestinalternativemethodsfortaxolproductionhasbeenincreasing.Amongallthewaystaxolproductionbyplantcellculturehasbeenconcen

7、trated.Bynowmuchprogresshasbeenmadeabouttheworkbuttheslowgrowthrateofthecellandlowyieldsoftaxolhaverestrictedthedevelopmentoftaxolproductionbyplantcellculture.Consideringthenongrowthrelatedproductionoftaxolthetwostepcult

8、ureofplantcellmaywork.wecansolvetherapidgrowthofcellculturesatthefirstandthentakemeanstoincreasethetaxolcontenttoreachthegoalofhigherbiomassaccumulationandtaxolyield.Herestudiedsomefactorsafectingcellgrowthduringthetaxol

9、productionbycellculturesofTaxuschinensisvar.mairei.Theresultswereasfollows:(1)Diferentbasalmedium(microelements，masselementsFesourceandorgnicsupplements)formulationswerestudiedtheresultsshowedthatcallusonBSmediumdisplaye