紅豆杉資源遺傳多樣性分析及南方紅豆杉愈傷組織誘導體系的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅豆杉是國家一級保護植物,由于紅豆杉含有具有重要的抗癌物質紫杉醇,紅豆杉資源的保護面臨著諸多困難.該研究從南方紅豆杉資源的有效保護出發(fā),以福建省武平縣梁野山國家自然保護區(qū)的萬畝南方紅豆杉自然種群為主要材料,研究南方紅豆杉群落的遺傳多樣性及其與其它類型紅豆杉資源的關系,并建立其愈傷組織誘導技術體系,主要結果如下:(1)南方紅豆杉側芽是誘導愈傷組織的最佳外植體.(2)南方紅豆杉愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基為:B<,5>+2,4-D 2.0mg/

2、L+NAA 1.0mg/L+IAA0.2mg/L+LH 2.0g/L+AC 0.5g/L.(3)紅豆杉愈傷組織增殖的培養(yǎng)基:B<,5>'+NAA 4.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+GA<,3> 0.2mg/L+AC 0.5g/L+LH 2.0g/L,AC、LH和GA<,3>三種物質一起使用,基本遏制了褐化的發(fā)生,可取得較好的效果.(4)南方紅豆杉RAPD分析的最佳技術體系為:25μl反應體積中,含200μmol/L dNTP,

3、0.2μmol/L隨機引物,30~100ng模板DNA,1.5UTaq DNA聚合酶.反應程序為:首先94℃預變性3.0 min;94℃變性1.0 min;36℃退火2.0 min,72℃延伸2.0 min,45個循環(huán)后,72℃延伸10.0 min.最后于4℃保存直至取出.(5)在11個供試材料中,9個RAPD引物共擴增出398條帶,多態(tài)性條帶比率(PPB)接近27％,表明供試紅豆杉材料之間的遺傳基礎較窄.(6)依據(jù)RAPD分析數(shù)據(jù),對

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