南方紅豆杉內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、以紫杉醇為代表的紫杉烷類化合物是一類新型的有效的天然抗腫瘤藥物,來源匱乏,價格高昂。紅豆杉又稱紫杉、赤柏松,為紅豆杉科紅豆杉屬植物,由于含有高效抗癌成分紫杉醇而受到濫砍濫伐,瀕臨滅絕,是國家重點保護植物。尋找更高效、廉價的紫杉醇來源以面對日益增長的需求,以真菌取代紅豆杉植物,通過微生物發(fā)酵途徑獲得豐富的紫杉醇來源是一個具有巨大發(fā)展空間的方向。
　　 對南方紅豆杉開展了內(nèi)生真菌的分離、篩選,以及產(chǎn)物的抗癌特性研究,目的在于尋找更廣

2、泛的紫杉醇來源以保護瀕臨滅絕的紅豆杉資源,獲得有效產(chǎn)生紫杉烷物質(zhì)的目標(biāo)新菌株,同時開發(fā)新的天然藥物,為解決紫杉醇生產(chǎn)中的一些關(guān)鍵問題和最終實現(xiàn)通過微生物工程生產(chǎn)該藥物奠定研究基礎(chǔ)。
　　 從10年以上樹齡的南方紅豆杉樹皮中分離紅豆杉內(nèi)生真菌,獲得了20個菌種。以紫杉醇(Taxol)為標(biāo)準(zhǔn)品,采用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)進行對內(nèi)生真菌的代謝產(chǎn)物進行分離和分析,從中篩選到了一株青霉菌H⑥.1可能有產(chǎn)紫杉醇類化

3、合物的能力。通過MTT比色分析法研究了H⑥.1的發(fā)酵產(chǎn)物對惡性黑色素瘤細胞A375的抗腫瘤特性。發(fā)酵產(chǎn)物對腫瘤細胞的抑制率呈濃度依賴性,濃度達到100μg/ml時,細胞的增殖抑制率達到50％。初步確證了南方紅豆杉內(nèi)生真菌產(chǎn)物的細胞毒性。
　　 從該菌株的代謝產(chǎn)物中分離到了一種化合物,采用紅外吸收光譜(IR)、質(zhì)譜(MS)、核磁(1H-NMR、13C-NMR)以及與已知化合物的文獻數(shù)據(jù)比較,鑒定該化合物為一種震顫毒素Penitre