南方紅豆杉新內(nèi)生真菌bionectriasp.的分離、鑒定及代謝物活性分析

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文南方紅豆杉新內(nèi)生真菌Bionectria sp.的分離、鑒定及代謝物活性分析姓名：余艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：胡昌華20070501西南大學(xué)碩七學(xué)俺論文 摘要相似化合物的能力。我國有紅豆杉屬植物4 種加l 變種，其中南方紅豆杉內(nèi)紫杉醇含量較高。到目前為止，世界范圍內(nèi)已發(fā)現(xiàn)不下3 0 種產(chǎn)紫杉醇內(nèi)生真菌，但是產(chǎn)量較低，尚未達到工業(yè)化生產(chǎn)標準。繼續(xù)尋找新的高產(chǎn)菌株仍然十分必要。本論文以南方紅

2、豆杉及其內(nèi)生真菌為主要試驗材料，從南方紅豆杉樹皮中分離到3 0 株內(nèi)生真菌。經(jīng)初步分類它們分別屬于鏈格孢屬( A l t e r n a r i a ) 、曲霉屬( A s p e r g t l l u s ) 、毛霉屬( M u c o r ) 、鏈毛孢屬( S t r o p t o t h r i x ) 、黑團孢屬( P e r i c o n i a ) 、黑曲霉屬( A s p e r g i l l i u sn i g

3、 e r ) 、樹粉孢屬( O i d i o d e n d r o n ) 等屬。利用T L C 和H P L C 方法從這些真菌中篩選產(chǎn)紫杉醇的微生物，得到l株產(chǎn)紫杉醇真菌——Ⅻ4 ，原始產(chǎn)量可達4 3 0 ．4 6 ．E d L 。對X H 4 的鑒定，本實驗結(jié)合形態(tài)學(xué)和I T S ．5 ，8 Sr D N A 序列兩種鑒定方法，確定其是生赤殼屬( B i o n e c t r m ) 真菌。這是目前世界上首次從紅豆杉科植物中

4、分離到該屬內(nèi)生真菌。豐富了紅豆杉科植物的內(nèi)生真菌種群。為深入挖掘X H 4 代謝產(chǎn)物的有價值資源，本實驗還對X H 4 的次生代謝產(chǎn)物進一步分離純化，并對各組分進行了抗菡、抗腫瘤活性分析?？咕钚詸z測結(jié)果表明，X H 4 代謝產(chǎn)物對白色假絲酵母( C a n d i d aa l b i c a n s ) 有顯著的抑制作用，對金黃色葡萄球菌( S t a p h y l o c o c c u s9 1 4 r c u s ) 和枯草

5、芽孢桿菌( B a c i l l u s Ⅻ6 “凰) 兩種革蘭式陽性致病菌也具有明顯的抑制作用，而對大腸桿菌( E s c h e r i c h m c o b ) 和銅綠假單孢菌( P s e u d o m o n a s a e r u g i n o s a ) 沒有抑制作用?？鼓[瘤活性檢測結(jié)果表明，X H 4 代謝產(chǎn)物對人宮頸癌細胞( H e L a 細胞) 具有很強的殺傷作用。本研究找到l 株產(chǎn)紫杉醇真菌，為微生物產(chǎn)紫