南方紅豆杉優(yōu)樹選擇及子代測(cè)定研究.pdf

1、南方紅豆杉(Taxuschinensisvar.mairer)又名美麗紅豆杉，是紅豆杉科紅豆杉屬紅豆杉(T.chinensis)的一個(gè)變種，也是紅豆杉屬植物在中國(guó)分布最廣泛的一種，為國(guó)家一級(jí)珍貴保護(hù)植物，它集用材、藥用和觀賞于一體，其體內(nèi)提取的紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是目前世界上公認(rèn)的廣譜、強(qiáng)活性的抗癌藥物，現(xiàn)已被多個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療卵巢癌和乳腺癌等。但因紅豆杉分布零散，極少成林，且生長(zhǎng)緩慢，且紫杉醇目前仍

2、依賴于從野生分布的紅豆杉屬植物體中提取，使其供求矛盾異常突出。亟待解決的紫杉醇資源問(wèn)題就成了世界各國(guó)研究的熱點(diǎn)，也是該藥能否擴(kuò)大應(yīng)用的關(guān)鍵因素。為緩解這一矛盾，本項(xiàng)目旨在福建省內(nèi)選出紫杉醇及其生物合成前提物含量高的優(yōu)樹，并進(jìn)行壯苗培育技術(shù)研究，本文是該項(xiàng)目的階段性試驗(yàn)結(jié)果。 1.通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，樣品重是提取測(cè)定的關(guān)鍵因素，同時(shí)，浸泡時(shí)間還是紫杉醇、10-去乙酰巴卡亭-Ⅲ、巴卡亭-Ⅲ提取測(cè)定的第二個(gè)關(guān)鍵因素。紫杉醇提取測(cè)定的最簡(jiǎn)

3、便方法為：稱取樣品3g，放入20ml甲醇與二氯甲烷的比例為9∶1的混合液中，在35℃下浸泡36h；10-去乙酰巴卡亭Ⅲ提取測(cè)定的最簡(jiǎn)便方法為：稱取樣品2g，放入20ml甲醇與二氯甲烷的比例為7∶1的混合液中，在40℃下浸泡12h；巴卡亭-Ⅲ提取測(cè)定的最簡(jiǎn)便方法為：稱取樣品3g，放入20ml甲醇與二氯甲烷的比例為9∶1的混合液中，在35℃下浸泡36h；三尖杉寧堿提取測(cè)定的最簡(jiǎn)便方法為：稱取樣品4g，放入10ml甲醇與二氯甲烷的比例為7∶1

4、的混合液中，在35℃下浸泡36h。 2.通過(guò)對(duì)南方紅豆杉的皮、根皮、根、種子、葉、小枝、干中Paclitaxel、10-DBAⅢ、BaccatinⅢ、Celphalimannine含量分析，結(jié)果表明Paclitaxel和Celphalimannine含量在樹體中的高低分布均為：皮＞根皮＞根＞種子＞葉＞小枝＞干；10-DBAⅢ在樹體中的高低分布為，葉＞皮＞根皮＞小枝＞種子＞根＞干；BaccatinⅢ含量在樹體中的高低分布為，葉＞小

5、枝＞種子＞皮＞根皮＞根＞干。 3.通過(guò)聚類分析，將福建省南方紅豆杉依紫杉醇及其同系物含量可分為三類。第Ⅰ類包括武夷山、浦城、永春和漳平這4個(gè)，為高含量地區(qū)，第Ⅱ類包括松溪、南平、三明、沙縣、明溪、龍巖、上杭、仙游、大田、德化、福清、閩侯、羅源、閩清、福鼎、古田、屏南、柘榮這18個(gè)地區(qū)，為中等含量種源；第Ⅲ類種源是永安，為低含量。根據(jù)綜合性狀評(píng)分法復(fù)選，把78株初選優(yōu)樹得分值分為4類，分別為“極高”、“高”、“中”、“低”4個(gè)等級(jí)

6、，其中前兩類共15株，為藥用型南方紅豆杉優(yōu)樹，入選率為19.23％。 4.基因庫(kù)共保存15個(gè)優(yōu)良藥用家系，59個(gè)無(wú)性系，目前生長(zhǎng)良好。項(xiàng)目開展三年以來(lái)，在福州扦插59個(gè)家系，共計(jì)保存插條苗木431株，在三明明溪扦插51家系，共計(jì)保存插條苗木1187株。 5.通過(guò)苗期區(qū)域子代測(cè)定結(jié)果表明，15個(gè)家系在兩試驗(yàn)點(diǎn)中均與對(duì)照均成正向極顯著差異，都是值得注意的優(yōu)良藥用家系。其中21、34、56、77這4個(gè)家系在S1和S2中的平均遺

7、傳增益都是最高，最值得關(guān)注。經(jīng)兩試驗(yàn)點(diǎn)聯(lián)合方差分析，家系主效應(yīng)、地點(diǎn)主效應(yīng)和家系x地點(diǎn)互作效應(yīng)均達(dá)極顯著。這表明試驗(yàn)中含有增、減產(chǎn)極顯著家系，而增、減產(chǎn)程度又與試驗(yàn)地點(diǎn)的不同而不同，參試地點(diǎn)間存在使所有家系都顯著增產(chǎn)或減產(chǎn)的效應(yīng)。對(duì)各家系紫杉醇平均含量、參試地點(diǎn)和各地點(diǎn)家系紫杉醇平均含量作多重比較，結(jié)果表明，15個(gè)家系均與對(duì)照有極顯著的正向差異，其中21、34、56、77個(gè)家系的對(duì)照遺傳增益都在60％以上，高于其他種源，其平均值達(dá)62.

8、28％。地點(diǎn)主效應(yīng)分析結(jié)果表明，兩地點(diǎn)效應(yīng)值都小于LSD0.05(60)，說(shuō)明兩地點(diǎn)效應(yīng)均不顯著。豐產(chǎn)性和穩(wěn)定性分析，結(jié)果表明家系14、21、23、28、34、56、62、71、76、77這10個(gè)家系適合在三明種植，而不適合在華安種植；而3、8、45、49這4個(gè)家系對(duì)環(huán)境反應(yīng)遲鈍，在兩試驗(yàn)地中紫杉醇含量差異較小，穩(wěn)產(chǎn)性較好。家系34是最值得重視的，豐產(chǎn)性最好；雖然家系34變異度較小，但是其變異系數(shù)大于1，也就是穩(wěn)產(chǎn)性不夠，有待于進(jìn)一步考