三尖杉內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物及抑菌活性的研究.pdf

1、植物內(nèi)生真菌種類豐富多樣，在植物中分布廣泛。近年來，已從植物內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了許多具有新穎結(jié)構(gòu)和獨(dú)特生理活性的化合物。目前，植物內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物抑菌活性的研究受到人們的廣泛關(guān)注，將成為新的天然抑菌藥物的重要來源。本文對(duì)藥用植物三尖杉內(nèi)生真菌進(jìn)行研究，以期為尋找新型抗菌物質(zhì)提供新的途徑。
　　 本文以采自秦嶺太白山地區(qū)的三尖杉（Cephalotaxusfortunei）為研究對(duì)象，從其種皮、莖和葉中分離得到61株內(nèi)生

2、真菌。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定，其中產(chǎn)孢的52株內(nèi)生真菌屬于3目，5科，9屬，而未產(chǎn)孢的9株暫未鑒定出。曲霉屬（Penicilliumsp.）、青霉屬（Penicilliumsp.）和鏈格孢屬（Alternariasp.）為三尖杉內(nèi)生真菌優(yōu)勢(shì)屬，占總分離菌株的49.18％。并對(duì)其中的1株高活性菌株Se01進(jìn)行分子鑒定，綜合形態(tài)學(xué)鑒定和18SrDNA序列分析，確定其為曲霉屬Aspergilluspiperis。
　　 通過對(duì)61株內(nèi)生真菌及其

3、次生代謝產(chǎn)物的抑菌活性研究發(fā)現(xiàn)，菌株Se01、St16和St24對(duì)15種指示菌的抑菌圈直徑在13～27mm范圍內(nèi)，表明這3株菌具有很強(qiáng)的抑菌活性。最后，確定以Se01為活性篩選的目標(biāo)菌株。
　　 對(duì)目標(biāo)菌株Se01進(jìn)行固體發(fā)酵，得到提取物粗品(98.33g)，采用硅膠柱層析、凝膠SephadexLH-20柱層析以及重結(jié)晶等一系列分離純化方法，結(jié)果得到7個(gè)化合物。通過分析化合物的理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定:化合物1為膠霉毒

4、素、化合物2為大黃素-8-甲醚、化合物3為單甲基硫赭曲菌素、化合物4為檸檬酸二甲酯、化合物5為5α，8α-環(huán)二氧麥角甾-6，22-二烯-3β-醇、化合物6為麥角甾醇以及化合物7為D-甘露醇。
　　 采用最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定化合物對(duì)指示菌的抑菌活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化合物1、2、3和4對(duì)6種指示菌均具有一定的抑菌活性，化合物1、3、4、5和6對(duì)細(xì)菌的抑制作用強(qiáng)于對(duì)植物病原真菌的抑制作用。其中化合物1和3的活性最好，對(duì)部分指示菌的M