三株刺松藻內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物及其生物活性研究.pdf

1、海洋微生物擁有豐富多樣的次生代謝途徑，其中海洋生物內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物研究日益受到天然產(chǎn)物化學(xué)界的重視。本論文選擇了三株刺松藻內(nèi)生真菌分別為玉米赤霉菌(Gibberella zeae)、焦曲霉(Aspergillus ustus)和雜色曲霉(Aspergillus versicolor)進(jìn)行了規(guī)模發(fā)酵和次生代謝產(chǎn)物研究，并對分離得到的部分化合物進(jìn)行了初步的生物活性評價(jià)。
　　 菌絲體和發(fā)酵液提取物采用常規(guī)的硅膠柱層析、凝膠Sep

2、hadexLH-20柱層析、制備薄層層析、制備高效液相色譜以及重結(jié)晶等分離手段，得到單體化合物。利用各種現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR、UV、EI-MS、HR-EI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、NOESY等)從三種菌株發(fā)酵提取物中分離鑒定了35個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。其中從菌株玉米赤霉菌中分離鑒定了9個(gè)化合物，發(fā)現(xiàn)1個(gè)新生物堿類化合物(GZ1)，包括1個(gè)生物堿類化合物(GZ1)和8個(gè)甾體類化合物(G

3、Z2-GZ9)；從菌株焦曲霉中分離鑒定了9個(gè)化合物，發(fā)現(xiàn)1個(gè)新甾體類化合物(AU1)，包括9個(gè)甾體類化合物(AU1-AU9)：從菌株雜色曲霉中分離鑒定了17個(gè)化合物，發(fā)現(xiàn)1個(gè)新倍半萜類化合物(AV1)，包括1個(gè)倍半萜類化合物(AV1)、5個(gè)生物堿類化合物(AV3-AV7)、1個(gè)蒽醌類化合物(AV2)、1個(gè)神經(jīng)酰胺類化合物(AV8)和9個(gè)甾體類化合物(AV9-AV17)。
　　 對分離到的單體化合物進(jìn)行了抗細(xì)菌活性試驗(yàn)結(jié)果表明，生

4、物堿類化合物GZ1(AV3)、AV4、AV5和AV6、倍半萜類化合物AV1、甾體類化合物AU1、AU3、AU4(AV17)、AV9、AV10和AV16以及蒽醌類化合物AV2對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有微弱的的抑制活性，其中化合物AU1、AU3、AU9、AV1、AV9、AV10和AV11對大腸埃希氏桿菌(Escherichia coli)顯示出微弱的抑制活性。
　　 對單體化合物的鹵蟲毒性試驗(yàn)

5、結(jié)果表明，甾體類化合物GZ2-GZ9，AU1-AU9，AV9-AV17對鹵蟲有弱的或中等強(qiáng)度的致死率，其中GZ7(AU5，AV14)顯示出較強(qiáng)的致死率62.5％：化合物AV9、AV1、AV8和AV2對鹵蟲有較強(qiáng)的致死率，其半數(shù)致死濃度為分別為14.85μg/mL、34.99μg/mL、27.71μg/mL，和0.29μgmL。
　　 對部分單體化合物的乙酰膽堿酯酶抑制活性試驗(yàn)結(jié)果表明，所測試的化合物對乙酰膽堿酯酶有弱的或微弱的抑

6、制活性，其中有些化合物還顯示微弱的促進(jìn)活性。
　　 對化合物GZ1的體外細(xì)胞毒(抗腫瘤)活性評價(jià)結(jié)果顯示，GZ1對人白血病HL-60腫瘤細(xì)胞株無顯著活性，對人肺癌A549和人肝癌BEL-7402細(xì)胞株顯示細(xì)胞毒活性，在10μM濃度下抑制率分別為61.8％和17.6％。
　　 本論文對三株內(nèi)生真菌的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，豐富了海洋天然產(chǎn)物的化合物結(jié)構(gòu)，通過活性測試發(fā)現(xiàn)了部分具有活性的化合物，為海洋微生物資源的有效利