植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)

1、一、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類型？其理論依據(jù)是什一、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類型？其理論依據(jù)是什么？么？（1）廣義的植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）是指在無菌和人工預(yù)知的控制條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或生長、分化成完整植株的技術(shù)。狹義的植物組織培養(yǎng)僅指對植物的組織（如分生組織、表皮組織、薄壁組織等）及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織（callus）進(jìn)行離體培養(yǎng)的

2、技術(shù)。（2）類型：植株的培養(yǎng)；胚胎培養(yǎng)；器官培養(yǎng)；組織培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)；原生質(zhì)體培養(yǎng)。（3）植物細(xì)胞全能性（totipotency）是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。它是指一個生活的植物細(xì)胞，只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核，它就會有一整套發(fā)育成一個完整植株的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)臈l件下，這些信息可以表達(dá)，再生成一個完整植株。三、試述目前植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用。三、試述目前植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用。答：（1）植物離體快繁、（2）無病毒苗木培育、（3）培育新品種或

3、創(chuàng)制新物種、（4）次生代謝物生產(chǎn)、（5）種質(zhì)資源保存（6）人工種子。一、簡述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。一、簡述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。培養(yǎng)基的滅菌方法培養(yǎng)基的滅菌方法：高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅茵法：培養(yǎng)基消毒滅菌時間不宜過長，也不可超過滅菌鍋規(guī)定的壓力范圍（1.15kgfcm2或O.15MPa，溫度126℃)；否則，培養(yǎng)基中的蔗糖、有機(jī)物質(zhì)，特別是維生素類物質(zhì)就會分解，導(dǎo)致培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。過濾除菌法過濾除菌法：

4、過濾滅菌的原理是溶液通過濾膜后，細(xì)菌的細(xì)胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。器具的滅菌方法器具的滅菌方法：（1）干熱滅菌法干熱滅菌法干熱滅菌法是將器具長時間放在高溫下消除雜菌的一種方法。其具體做法是將需要滅菌的器具(玻璃器皿或器械)先用鋁箔包好，放入溫度設(shè)定為150℃的恒溫干燥箱內(nèi)，保溫2h，取出冷卻后便可以使用。（2）高壓蒸汽滅茵法）高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅菌法是將需滅菌的玻璃器皿、器械或培養(yǎng)基等放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，通過高溫高壓進(jìn)行滅菌

5、的一種方法。一般在1.06kg／cm2的壓力下(121℃)下保持15～20min，就可達(dá)到滅菌效果。對于無菌操作所用的各種器械，如鑷子、解剖刀、解剖針等，可采用灼燒滅菌。一般的消毒辦法是把它們先在95％酒精中浸一下，然后再置火焰上灼燒，然后放在滅過菌的支架上，待冷卻后使用。二、簡述植物材料消毒的一般過程。二、簡述植物材料消毒的一般過程。第一步：材料的修整、刷洗、沖洗。第二步：是用洗衣粉水或肥皂水浸洗并攪動。第三步：材料的表面滅菌。D(2

6、，4－二氯苯氧乙酸)、NAA(萘乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)，它們作用的強(qiáng)弱順序為：24－DNAAIBAIAA。在培養(yǎng)基中加入細(xì)胞分裂素的目的，主要是為促進(jìn)細(xì)胞分裂和由愈傷組織或器官上分化不定芽。作用的強(qiáng)弱順序為：TDZ，4PUZT2－iP6－BAKT(7)瓊脂：它的主要作用是使培養(yǎng)基在常溫下凝固，同時不參與代謝(8)其他成分：①活性炭減少一些有害物質(zhì)的影響，性炭使培養(yǎng)基變黑，有利于某些植物生根，對形態(tài)發(fā)生和器官形成有

7、良好的效應(yīng)。②硝酸銀起到促進(jìn)愈傷組織器官發(fā)生或體細(xì)胞胚胎發(fā)生的作用，并能使某些原來再生困難的物種分化出再生植株。③抗生素防止由外植體內(nèi)生菌造成的污染，減少培養(yǎng)物中材料的損失。④防止酚類物質(zhì)污染的添加劑洗滌剛切割的外植體傷口表面，或過濾滅菌后加入固體培養(yǎng)基的表層.一、簡述植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞分化、脫分化與再分化的概念一、簡述植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞分化、脫分化與再分化的概念。（1）植物細(xì)胞全能性）植物細(xì)胞全能性（totipotencytoti

8、potency）是指一個生活的植物細(xì)胞，只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核，它就會有一整套發(fā)育成一個完整植株的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)臈l件下，這些信息可以表達(dá)，再生成一個完整植株。（2）細(xì)胞）細(xì)胞分化(differentiation)(differentiation)是指生物在個體發(fā)育過程中細(xì)胞由一般變?yōu)樘厥獾默F(xiàn)象，即普通形態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞，向著不同形態(tài)結(jié)構(gòu)的方向發(fā)展，從而在機(jī)能上也各不相同。（3）脫分化脫分化(dedifferentiation)(

9、dedifferentiation)由失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂，形成一種高度液泡化的呈無定形態(tài)的薄壁細(xì)胞即愈傷組織的現(xiàn)象（4）再分化（）再分化（redifferentiationredifferentiation）由無分化的愈傷組織的細(xì)胞再轉(zhuǎn)變成為具有一定結(jié)構(gòu)，執(zhí)行一定生理功能的細(xì)胞團(tuán)和組織，進(jìn)而構(gòu)成一個完整的植物體或植物器官的現(xiàn)象（或過程），二、再分化有哪幾種方式？它們的特點是什么？二、再分化有哪幾種方式？它們的特

10、點是什么？再分化有兩種途徑，一種是器官發(fā)生器官發(fā)生(ganogenesis)(ganogenesis)途徑途徑，一種是胚胎胚胎發(fā)生發(fā)生(embryogenesis)(embryogenesis)途徑途徑。前者具體包括：①先形成芽，后在芽基部長根；②先形成根，再從根基部形成芽；③在愈傷組織不同部位分別形成芽和根，然后根、芽的維管束接通形成完整植株；④僅形成芽或根（如茶樹的花粉愈傷組織誘導(dǎo)器官分化時，往往只形成根，而芽的發(fā)生則十分困難）。在

11、大多數(shù)情況下，再分化過程是在愈傷組織細(xì)胞中發(fā)生的，但在有些情況下，再分化可以直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞中，無須經(jīng)歷愈傷組織階段。四、試述優(yōu)良愈傷組織應(yīng)用具備的特點及獲得優(yōu)良愈傷組織的方四、試述優(yōu)良愈傷組織應(yīng)用具備的特點及獲得優(yōu)良愈傷組織的方法。法。特點（1）高度的胚性或再分化能力，以便從這些愈傷組織得到再生植株。（2）容易散碎，以便用這些愈傷組織建立優(yōu)良的懸浮系，并且在需要時能從中分離出全能性原生質(zhì)體。（3）旺盛的自我增殖能力，以便用這些愈