植物組織培養(yǎng)復習習題

1、1緒論緒論課后討論題：課后討論題：1、對植物組織培養(yǎng)技術(shù)的展望。2、植物組織培養(yǎng)發(fā)展史的各個時期，有哪些主要的培養(yǎng)技術(shù)獲得成功？課外作業(yè)題：課外作業(yè)題：1、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類型？其理論依據(jù)是什么？、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類型？其理論依據(jù)是什么？植物組織培養(yǎng)的概念可以分為廣義和狹義。廣義的植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）是指在無菌和人工預知的控制條件下，利用適當?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器在無菌和

2、人工預知的控制條件下，利用適當?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織或細胞進行離體培養(yǎng)，使其再生細胞或生長、分化成完整植株的技術(shù)。官、組織或細胞進行離體培養(yǎng)，使其再生細胞或生長、分化成完整植株的技術(shù)。狹義的植物組織培養(yǎng)僅指對植物的組織（如分生組織、表皮組織、薄壁組織等）及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織（callus）進行離體培養(yǎng)的技術(shù)。從培養(yǎng)對象上來看，植物組織培養(yǎng)主要有植株的培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)及原生質(zhì)體培養(yǎng)，目前，由這六方面的

3、研究類型又延伸出多種應用領(lǐng)域的研究工作。植物組織培養(yǎng)的主要特點是采用微生物學的實驗手段來操作植物離體的器官、組織和細胞。2、從外植體到小植株有哪些培養(yǎng)途徑？、從外植體到小植株有哪些培養(yǎng)途徑？離體器官的分化有三種比較典型的分化途徑：一是由分生組織直接分生芽；二是由分生組織形成愈傷組織，經(jīng)過分化實現(xiàn)細胞的全能性；三是游離細胞或原生質(zhì)體形成胚狀體(embryoid)，由胚狀體直接重建完整植株，或制成人工種子后再重建植株。愈傷組織再分化時，可經(jīng)

4、過兩條途徑，一是由愈傷組織的部分細胞先分化產(chǎn)生芽（或根），再在另一種培養(yǎng)基上產(chǎn)生根（或芽），形成一個完整的植株，因為芽和根都是植物體的器官，所以這一過程叫器官發(fā)生途徑器官發(fā)生途徑。二是在愈傷組織中產(chǎn)生出一些與種子中的胚相似的結(jié)構(gòu)，即同時形成一個有苗端和根端的兩極性結(jié)構(gòu)，然后再在另一種培養(yǎng)基上同時發(fā)展成帶根苗，由于這一過程與種子中胚的形成和種子萌發(fā)時形成幼苗的過程相似，所以叫做胚狀體發(fā)生或無性胚胎發(fā)生胚狀體發(fā)生或無性胚胎發(fā)生。3等已造成相

5、當數(shù)量的植物物種消失或正在消失，特別是具有獨特遺傳性狀的生物物種的絕跡更是一種不可挽回的損失。現(xiàn)在已有許多種植物在離體條件下，通過抑制生長或超低溫貯存的方法，使培養(yǎng)材料能長期保存，并保持其生活力，既節(jié)約了人力、物力和土地，還防止了有害病蟲的人為傳播，更便于種質(zhì)資源的交換和轉(zhuǎn)移，給保存和搶救有用基因帶來了希望。6人工種子人工種子第1章植物組織培養(yǎng)實驗室的基本設(shè)備和一般技術(shù)植物組織培養(yǎng)實驗室的基本設(shè)備和一般技術(shù)課堂討論題：課堂討論題：1、為

6、了降低生產(chǎn)成本，組培室的設(shè)計應注意哪些問題？2、在高溫高壓滅菌過程中應該注意的哪些問題？課外作業(yè)題課外作業(yè)題1、簡述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。、簡述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基由于含有高濃度蔗糖，能供養(yǎng)很多微生物如細菌和真菌的生長。一旦接觸培養(yǎng)基，這些微生物的生長速度一般都比培養(yǎng)的組織快得多，最終將把組織全部殺死。這些污染微生物還可能排泄對植物組織有毒的代謝廢物。因此，在培養(yǎng)容器內(nèi)部保持一個完全無菌的環(huán)境是絕對

7、必須的。為達到這個目的，有兩點必須注意：①不要與微生物工作者或病理工作者共用組織培養(yǎng)工作區(qū)；②一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，立即將污染的培養(yǎng)物拿出培養(yǎng)室進行處理。（1）培養(yǎng)基的滅菌）培養(yǎng)基的滅菌A高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅茵法由于未經(jīng)滅菌處理的培養(yǎng)基既可能帶有各種雜菌，同時又是各種雜菌良好的生長繁殖場所，因此培養(yǎng)基分裝后應立即置于高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)進行滅菌。高壓蒸氣滅菌有大型臥式、中型立式、小型手提式等多種，在使用高壓滅菌鍋時，應注意以下幾點：①使用高壓鍋前應

8、添加足夠的水；②鍋內(nèi)氣壓太高(超過1.52105Pa)會引起部分有機物質(zhì)的分解；③滅菌后在氣壓表歸零之前不要打開鍋蓋，以免發(fā)生危險和培養(yǎng)基外濺現(xiàn)象；④橡膠等有機物品會因高溫高壓而變性；⑤高壓滅菌鍋內(nèi)有一個自動排氣的小孔，不要使其堵塞，否則會因氣壓升高而引起危險。B過濾除菌法過濾除菌法當培養(yǎng)基中含有吲哚乙酸、玉米素及某些維生素等遇熱不穩(wěn)定的生物活性物質(zhì)，不能進行高壓蒸氣滅菌，而必須采用過濾方法滅菌。過濾滅菌的原理是溶液通過濾膜過濾滅菌的原

9、理是溶液通過濾膜后，細菌的細胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。后，細菌的細胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。通常采用減壓過濾裝置和過濾滅菌器，前者主要由過濾器和抽氣系統(tǒng)兩部分構(gòu)成，后者需在超凈工作臺上進行，適合少量溶液過濾。首先將滅菌過程中需使用的所有器皿用干熱滅菌法或高壓滅菌法滅菌，然后再進行培養(yǎng)基的除菌操作。除菌后的培養(yǎng)基需要在超凈工作臺內(nèi)分裝。與高壓滅菌方法相比，過濾除菌法操作麻煩，有時效果不如高壓滅菌法，但是可以確保有機添加物不被破