小鼠受精前后轉(zhuǎn)錄譜重編程及染色質(zhì)重組機(jī)制.pdf

1、轉(zhuǎn)錄譜重編程主要發(fā)生在卵母細(xì)胞生成后期及附植前胚胎發(fā)育階段，我們用免疫組化和熒光分子追蹤的方法研究了母源特異性轉(zhuǎn)錄譜在受精后轉(zhuǎn)變成合子轉(zhuǎn)錄譜的基本機(jī)理，發(fā)現(xiàn)在GV(GerminalVesicle)期卵母細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄停止的時(shí)候，包括通用轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)子在內(nèi)的一組染色質(zhì)因子(ChromatinFactors，CFs)從染色質(zhì)上解離，CFs的全面解離破壞了染色質(zhì)和CFs的物理聯(lián)系，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄中止，并功能性清除了母源特異的轉(zhuǎn)錄譜。受精或孤雌激活

2、后，關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)子在原核形成后不久重新與染色質(zhì)結(jié)合。CFs與染色質(zhì)的再結(jié)合伴隨了核功能的重建，包括DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄功能的恢復(fù)。據(jù)此認(rèn)為母源性的轉(zhuǎn)錄程序在卵子發(fā)生過程中被清除了，產(chǎn)生一個(gè)相對(duì)原始的單倍體染色質(zhì)，受精或孤刺激活后合子的轉(zhuǎn)錄程序才被重新建立，這個(gè)過程我們稱為“清除-重建”過程，通過它可以將母源性的轉(zhuǎn)錄譜重新設(shè)定成合子的轉(zhuǎn)錄譜。 在轉(zhuǎn)錄譜重編程過程中，染色質(zhì)/體結(jié)構(gòu)的變化為功能的重編程提供了基礎(chǔ)。

3、 在第二章中，用免疫組化的方法研究了受精后附植前胚胎染色質(zhì)/體結(jié)構(gòu)及其組蛋白修飾的變化，發(fā)現(xiàn)圍繞在1細(xì)胞胚胎原核核仁周圍的異染色質(zhì)在胚胎卵裂到2細(xì)胞胚胎時(shí)，大部分已經(jīng)從原核周圍解離并定位在核內(nèi)除核仁外的其他部分，成較大點(diǎn)狀分布。雖然2細(xì)胞到桑椹胚階段異染色質(zhì)染色強(qiáng)度有所增強(qiáng)，但是在桑椹胚發(fā)育到孵化囊胚階段時(shí)，異染色質(zhì)的強(qiáng)度和致密度又開始逐步降低，在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞中致密度達(dá)到最大程度的松散，強(qiáng)度最弱；另外發(fā)現(xiàn)常/異染色質(zhì)的相關(guān)組蛋白修飾在內(nèi)