天然蜂巢黃酮類化合物的鑒定和活性研究.pdf

1、本文以蜂巢為實(shí)驗(yàn)原材料，對(duì)蜂巢的生物活性成分進(jìn)行了系統(tǒng)分析，運(yùn)用基質(zhì)固相分散法優(yōu)化出蜂巢黃酮類化合物的最佳提取工藝條件，并運(yùn)用高效液相色譜儀進(jìn)行含量測(cè)定;分離純化后進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。同時(shí)本文還對(duì)蜂巢中黃酮類化合物的抗氧化活性以及抑菌能力進(jìn)行了研究，其結(jié)果如下:
　　1.通過直接滴定法、凱氏定氮法、茚三酮分光光度法、紫外分光光度法等化學(xué)方法對(duì)蜂巢中所含的總糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸等進(jìn)行了定量分析。
　　2.分析比較了三種蜂巢黃

2、酮類化合物的提取方法，確定了最佳提取方法為基質(zhì)固相分散法。通過對(duì)分散劑、分散劑與樣品質(zhì)量的比例、淋洗劑、淋洗劑用量、洗脫劑、洗脫劑用量等單因素的優(yōu)化得出，蜂巢黃酮類化合物的最佳提取條件為:采用硅膠為分散劑、分散劑與樣品質(zhì)量比為4∶1。以正己烷為淋洗劑，用量為20mL。以甲醇為洗脫劑，用量為20mL。此條件下黃酮類化合物的提取率為5.4mg/g。
　　3.采用高效液相色譜法對(duì)蜂巢黃酮化合物進(jìn)行定性定量分析，以0.2％磷酸水溶液-乙腈

3、為流動(dòng)相，梯度洗脫條件下得出的蜂巢黃酮類化合物的提取率分別為蘆丁12.68ug/g，桑色素137.72 ug/g、木犀草素23.07 ug/g、槲皮素76.34 ug/g、芹菜素21.09ug/g、白楊素331.98 ug/g、山奈素291.64 ug/g。
　　4.采用D-101型大孔樹脂濕法裝柱對(duì)蜂巢黃酮化合物進(jìn)行純化，得到純化的最佳條件為:以1mL/min的流速上樣30mL樣品溶液，待其充分吸附后用65％乙醇為洗脫劑，以1m

4、L/min的流速進(jìn)行洗脫。
　　5.分別采用紫外分光光度計(jì)、紅外光譜儀、質(zhì)譜儀等對(duì)得到的7個(gè)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
　　6.采用體外抗氧化模型對(duì)蜂巢黃酮類化合物的抗氧化活性進(jìn)行了研究。以不同濃度的維生素C為對(duì)照品，通過測(cè)定蜂巢黃酮類化合物對(duì)DPPH、超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除率，得出蜂巢黃酮類化合物具有較強(qiáng)的抗氧化活性。
　　7.研究了蜂巢黃酮類化合物的抑菌活性，實(shí)驗(yàn)表明蜂巢黃酮類化合物對(duì)放線菌(Salmonel