OTUB1在結(jié)腸癌中的表達(dá)及與其DCN關(guān)系的初步研究.pdf

1、目的：泛素-蛋白酶體途徑是調(diào)控細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解的重要途徑，涉及細(xì)胞周期調(diào)控、信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞DNA修復(fù)、炎癥反應(yīng)及腫瘤發(fā)展等多個(gè)方面。去泛素化酶可逆向調(diào)控該途徑。飾膠蛋白聚糖（decorin，DCN）是細(xì)胞外基質(zhì)一種成分，能夠抑制腫瘤細(xì)胞生長、逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞表型、抑制腫瘤血管生成。DCN主要通過泛素-蛋白酶體途徑進(jìn)行降解。卵巢腫瘤相關(guān)蛋白酶B1（OTU domain-containing ubiquitin aldehyde-bind

2、ing protein B1，OTUB1)屬于去泛素化酶家族的成員，既可以抑制蛋白的泛素化，也可以促進(jìn)泛素化過程。本研究旨在探討OTUB1在結(jié)腸組織中的表達(dá)，并進(jìn)一步探討OTUB1與DCN之間的表達(dá)趨向。
　　方法：收集結(jié)腸癌、腺瘤、正常粘膜組織，采用免疫組織化學(xué)法檢測OTUB1在結(jié)腸組織的表達(dá)。應(yīng)用RT-PCR檢測結(jié)腸癌組織中DCN的mRNA表達(dá)。選定穩(wěn)定轉(zhuǎn)染OTUB1的結(jié)腸癌細(xì)胞系lovo和轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒結(jié)腸癌細(xì)胞系lovo（對

3、照組）作為研究對象，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real time quantitative PCR，real time qPCR)和Western blotting，在mRNA和蛋白水平上檢測OTUB1與DCN的表達(dá)。
　　結(jié)果：①免疫組化：OTUB1在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)明顯高于正常粘膜組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②RT-PCR結(jié)果顯示結(jié)腸癌組織中擴(kuò)增出的295bp目的DCN條帶明顯增亮，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0