熱休克蛋白60在左半結(jié)腸癌中和在結(jié)腸癌組織差異表達(dá)的研究.pdf

1、目的:應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌組織中差異表達(dá)的蛋白,并應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)檢測(cè)的蛋白進(jìn)行驗(yàn)證,為左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌在腫瘤生物學(xué)方面的差異提供分子遺傳學(xué)依據(jù)。
　　 方法:取人左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌組織標(biāo)本,置-70℃超低溫冰箱中保存,病理診斷均為中分化腺癌。應(yīng)用雙向凝膠電泳分離左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌組織及配對(duì)癌旁組織標(biāo)本的總蛋白質(zhì),凝膠銀染和考馬斯亮藍(lán)染色,建立雙向凝膠電泳圖譜,經(jīng)PDQuest軟件進(jìn)行

2、圖像分析,篩選部分分離較好的差異蛋白質(zhì)點(diǎn),應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn),獲取肽質(zhì)量指紋圖譜,鑒定蛋白質(zhì);應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)檢測(cè)出的一個(gè)差異表達(dá)蛋白的表達(dá)狀態(tài)進(jìn)行驗(yàn)證,并對(duì)在相關(guān)臨床病例特征進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:建立了左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌組織的凝膠電泳圖譜,篩選出55個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn),成功鑒定出20種差異蛋白質(zhì),與右半結(jié)腸癌比較,12種蛋白在左半結(jié)腸癌表達(dá)上調(diào),8種蛋

3、白在左半結(jié)腸癌表達(dá)下調(diào),其中左半結(jié)腸癌中熱休克蛋白60表達(dá)上調(diào),通過(guò)免疫組織化學(xué)方法證實(shí)左側(cè)結(jié)腸癌中熱休克蛋白60的表達(dá)高于右半結(jié)腸癌。
　　 結(jié)論:左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌存在差異表達(dá)的蛋白質(zhì);熱休克蛋白60在左半結(jié)腸癌表達(dá)較右半結(jié)腸癌上調(diào),這些可能是左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌生物學(xué)行為差異的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。表達(dá)差異的蛋白質(zhì)可能為闡明左半結(jié)腸癌和右半結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展的差別提供證據(jù)和線索,并且可能成為診斷和靶向治療以及藥物開(kāi)發(fā)提供依據(jù)