冷休克蛋白Bc-Csp熱穩(wěn)定性研究.pdf

1、蛋白質的熱穩(wěn)定性是當前蛋白質研究中的一個熱點問題。每個蛋白質都有最適宜發(fā)揮其功能的溫度，過高或過低的溫度都會使得蛋白質變性而喪失其功能。如何提高蛋白質的熱穩(wěn)定性，使其在較高的溫度下保持原有的結構和功能，是蛋白質工程中需要解決的問題。嗜熱蛋白耐熱機理的深入研究，對于人們深入理解蛋白質的折疊、結構與功能、進化等問題有著重要的意義。
　　 本論文主要對冷休克蛋白Bc-Csp的熱穩(wěn)定性進行了研究。嗜熱蛋白Bc-Csp和嗜溫蛋白Bs-Cs

2、pB的序列和結構非常相似，但是他們的熱穩(wěn)定性卻有很大的差異。
　　 已有研究表明，盡管這兩個蛋白的序列中有12 處不同，但是只有兩個在蛋白質表面的氨基酸對增加嗜熱蛋白Bc-Csp的熱穩(wěn)定性起了主要作用。
　　 我們發(fā)展了一個利用全原子模型模擬計算來研究蛋白質熱穩(wěn)定性的新方法，提出了一個假設―離子鍵對蛋白質的熱穩(wěn)定性幾乎沒有影響。在此基礎上，計算了Bc-Csp的21個突變體相對于它的熱穩(wěn)定性的變化量。研究發(fā)現(xiàn)計算結果與實驗

3、測量結果有很好的關聯(lián)性，從而說明我們的假設可能是正確的，我們的模擬計算方法是可信的。
　　 進一步，我們對增加嗜熱蛋白Bc-Csp熱穩(wěn)定性的原因進行了仔細分析。得到了與實驗研究相似的結論：第3位的精氨酸R對增加嗜熱蛋白Bc-Csp的熱穩(wěn)定性的貢獻來源于兩個方面，其中1/3是范德瓦耳斯相互作用能，2/3 是靜電相互作用能；
　　 第66位的亮氨酸L對增加嗜熱蛋白Bc-Csp的熱穩(wěn)定性的貢獻來源于范德瓦耳斯相互作用；第46位