Apaf-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2和p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、乳腺癌是一種嚴(yán)重影響女性健康的常見的惡性腫瘤，每年全球都有上百萬的新發(fā)患者。根據(jù)不同的病理分型可以將其分為5種不同的亞型，分別為管腔A型（luminal A subtype）、管腔B型（luminal B subtype）、正常乳腺樣型（normal breast-like subtype）、HER-2過表達(dá)型（HER-2 over-expressing subtype）和基底細(xì)胞樣型（basal-like subtype)，各型乳腺癌

2、具有不同的生物學(xué)行為，對(duì)于評(píng)價(jià)乳腺癌預(yù)后方面具有重要意義。在各型乳腺癌中又以基底細(xì)胞樣型乳腺癌預(yù)后最差，其發(fā)病率約占全部乳腺癌的20％?；准?xì)胞樣乳腺癌在臨床表現(xiàn)、鏡下表現(xiàn)及免疫表型方面均有特征性表現(xiàn)，它術(shù)后極易發(fā)生復(fù)發(fā)及出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且該種類型乳腺癌對(duì)目前已知的療效確切的內(nèi)分泌治療方法不敏感，目前尚無有效的靶向治療方法。因此基底細(xì)胞樣乳腺癌成為目前研究的熱點(diǎn)而被廣泛關(guān)注。
　　凋亡是細(xì)胞內(nèi)存在的一種程序性自殺機(jī)制，可使細(xì)胞崩解為

3、凋亡小體，然后由周圍的吞噬細(xì)胞識(shí)別和吞噬。本實(shí)驗(yàn)主要從細(xì)胞凋亡的線粒體途徑方向介紹基底細(xì)胞樣乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，相關(guān)蛋白有Apaf-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2、p53。
　　Apaf-1（凋亡蛋白酶活化因子1）在線粒體凋亡途徑中具有重要作用，此基因缺失可造成實(shí)驗(yàn)小鼠神經(jīng)組織增生，腦組織發(fā)育畸形。Apaf-l能與Cyt-C形成Apaf-1/Cyt-C體復(fù)合，當(dāng)該復(fù)合體與ATP結(jié)合后，Apaf-1的CARD結(jié)構(gòu)域就可以進(jìn)

4、一步結(jié)合Caspase-9進(jìn)而形成凋亡小體。凋亡小體再通過活化Caspase-3而啟動(dòng)Caspase系列反應(yīng)。
　　Caspase是一個(gè)半胱氨酸蛋白酶家族。細(xì)胞線粒體凋亡通路中，Caspase-9位于此通路一系列反應(yīng)的上游，是較重要的起始因子之一，在其它輔助因子的參與下進(jìn)行自我活化并激活下游的Caspase-7，Caspase-3等因子，進(jìn)而引起一系列因子活化反應(yīng)，從而使細(xì)胞的凋亡程序順利進(jìn)行。
　　Bcl-2基因是從B細(xì)胞

5、淋巴細(xì)胞瘤中分離得到的一種與細(xì)胞凋亡相關(guān)的癌基因，又被稱做凋亡抑制基因。相關(guān)研究證實(shí)bcl-2基因及其蛋白在多種生物細(xì)胞線粒體凋亡通路中具有顯著的抑制作用。
　　Bax基因是眾多Bcl-2基因家族中的一員，在線粒體凋亡通路中起促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，一般與Bcl-2協(xié)同作用于線粒體膜，調(diào)控生物細(xì)胞凋亡。
　　p53是目前發(fā)現(xiàn)最早研究最深入的抑癌基因之一，其核蛋白產(chǎn)物可使細(xì)胞生長分化阻滯、誘導(dǎo)生物細(xì)胞調(diào)亡，但突變型p53卻失去了抑

6、制腫瘤細(xì)胞的作用,它可誘導(dǎo)細(xì)胞生長，阻止生物細(xì)胞凋亡，因而突變型p53是腫瘤形成過程中的一個(gè)重要的促進(jìn)因子。
　　本研究擬通過檢測(cè)Apaf-1、Caspase-9、Bcl-2、Bax、p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中的表達(dá)情況，探討基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）與細(xì)胞線粒體凋亡途徑的關(guān)系，初步研究基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，以期為患者的臨床治療及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。
　　目的:
　　通過檢測(cè)Ap

7、af-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2、p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中的表達(dá)，探討基底細(xì)胞樣乳腺癌與細(xì)胞凋亡線粒體途徑的關(guān)系，初步研究基底細(xì)胞樣乳腺癌的發(fā)生、發(fā)病機(jī)制，為患者的臨床治療及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　選取基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）43例，非基底細(xì)胞樣乳腺癌
　?。╪on-BLBC）57例，正常乳腺組織(取自距腫瘤邊緣大于5 cm的正常乳腺組織)60例，采用免疫組織化學(xué)Env

8、ision兩步法檢測(cè)Apaf-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2和p53蛋白在BLBC、non-BLBC和正常乳腺組織中的表達(dá)，分析Apaf-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2和p53與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期之間的相關(guān)性；采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組指標(biāo)的陽性表達(dá)率比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　

9、1. Apaf-1在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中陽性表達(dá)率為23.26%
　?。?0/43），在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）陽性表達(dá)率為49.12%（28/57），癌旁正常組織中表達(dá)陽性率為75.00%（45/60）。兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　2. Caspase-9在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中陽性表達(dá)率為27.91%（12/43），在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）陽性表達(dá)率

10、為54.39%（31/57），癌旁正常組織中表達(dá)陽性率為85.00%（51/60）。兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　3. Bax在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中陽性表達(dá)率為20.93%（9/43），在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）陽性表達(dá)率為45.61%（26/57），癌旁正常組織中表達(dá)陽性率為76.67%（46/60）。兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　4. Bcl-2在基底細(xì)

11、胞樣乳腺癌（BLBC）中陽性表達(dá)率為69.77%
　?。?0/43），在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）陽性表達(dá)率為43.86%（25/57），癌旁正常組織中表達(dá)陽性率為21.67%（13/60）。兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　5. p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中陽性表達(dá)率為79.07（34/43），在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）陽性表達(dá)率為52.63（30/57），癌旁正常組織

12、中表達(dá)陽性率為5.00%（3/60）。兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　Apaf-1、Caspase-9、Bax在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）組中的陽性表達(dá)率顯著低于在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-BLBC）和癌旁正常組織中的表達(dá)率，且Apaf-1、Caspase-9、Bax的表達(dá)率互呈正相關(guān)。Bcl-2、p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）組中的陽性表達(dá)率顯著高于在非基底細(xì)胞樣乳腺癌（non-B

13、LBC）和癌旁正常組織中的表達(dá)率，兩者表達(dá)呈正相關(guān)。Apaf-1在基底細(xì)胞樣乳腺癌（BLBC）中的陽性表達(dá)率與腫瘤的大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期相關(guān)（p<0.05），而與病人的年齡無相關(guān)性。而Caspase-9、bcl-2、bax和p53在基底細(xì)胞樣乳腺癌(BLBC)中的陽性表達(dá)率和腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)（p<0.05），與病人年齡及腫瘤大小無顯著相關(guān)性。上述結(jié)論表明Apaf-1、Caspase-9、Bcl-2、Bax和p5