金屬螯合載體的制備及其用于固定化酶的研究.pdf

1、固定化酶對提高酶的穩(wěn)定性，拓展酶的應(yīng)用領(lǐng)域具有非常重要的意義。目前常用固定化方法普遍存在固定化使用試劑和載體成本高，固定化過程中酶的構(gòu)象受到影響及底物結(jié)合部位和活性中心受載體封閉所引起的酶活損失較大，固定化操作過程繁瑣等缺點(diǎn)，限制了固定化酶的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。 針對當(dāng)前固定化酶載體和方法的不足，本文采用反相懸浮包埋法合成磁性瓊脂糖微球，經(jīng)環(huán)氧氯丙烷和亞氨基二乙酸處理使微球帶上螯合基團(tuán)，經(jīng)吸附銅離子后，制備了磁性瓊脂糖—亞氨基二乙酸(I

2、DA)-Cu2+金屬螯合載體，利用該載體定向固定了木瓜蛋白酶，固定化最適條件為Cu2+1.5×10-2mol/g載體、固定化時(shí)間4h、固定化pH7.0、給酶量30mg/g載體。固定化酶的最適反應(yīng)溫度70℃、最適反應(yīng)pH8.0，固定化酶的熱穩(wěn)定性明顯高于溶液酶，固定化酶活力回收為68.4％，且有較好的操作穩(wěn)定性，載體重復(fù)使用5次后固定化酶酶活為首次固定化酶79.71％。 本文研究了利用金屬螯合載體固定多酚氧化酶時(shí)，固定化酶的性質(zhì)。