新型磁柔性載體的制備及固定化脂肪酶的應(yīng)用研究.pdf

1、脂肪酶(lipase，EC3.1.1.3)，學(xué)名甘油三酯水解酶(triacylglycerolhydrolase)，能催化甘油酯水解產(chǎn)生甘油和脂肪酸，亦可催化羧酸脂類水解產(chǎn)生醇類和脂肪酸。在催化酯化和酯交換反應(yīng)過程中，能夠表現(xiàn)出優(yōu)異的化學(xué)、區(qū)域和立體選擇性。由于脂肪酶優(yōu)異的催化性和其對(duì)手性底物的多樣選擇性，其已經(jīng)成為固定化酶技術(shù)中重要的研究對(duì)象。固定化技術(shù)可提高酶的穩(wěn)定性、達(dá)到連續(xù)化操作和降低生產(chǎn)成本的目的。本文在前人的基礎(chǔ)上采用柔性共

2、價(jià)結(jié)合法，利用鄰苯二酚類衍生物所具備的仿生粘附特性，實(shí)現(xiàn)對(duì)磁納米粒子的包裹，利用改性多糖接枝于載體表面，制備磁柔性固定化載體。最后將制備得到的磁柔性固定化載體用于固定化脂肪酶。主要研究結(jié)果如下:
　　1、利用共價(jià)組裝的方法將聚多巴胺(PDA)和氧化雙醛淀粉(DAS)組裝在超順磁性Fe3O4磁性納米粒子上制備新型磁柔性載體(Fe3O4-PDA-DAS)。對(duì)合成材料采用元素分析儀、掃描電鏡、振動(dòng)磁強(qiáng)計(jì)(VSM)、熱重分析(TGA)、X

3、射線粉末衍射儀(XRD)、紅外光譜(FT-IR)和Zeta表面電位變化等進(jìn)行表征。通過表征手段綜合分析得出改性載體材料具有良好的超順磁性、較好的熱穩(wěn)定性，且晶體結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變。均勻分布的磁性納米微球的粒徑值為209.6 nm。
　　2、以磁性納米粒子為載體，運(yùn)用席夫堿還原產(chǎn)物對(duì)磁納米粒子進(jìn)行黏附包裹，合成新型磁性仿生黏附材料(CMCC/DHBH-Fe3O4)。并對(duì)合成材料采用EA、SEM、VSM、XRD、TGA、FT-IR和Zet

4、a表面電位變化等進(jìn)行表征。通過表征手段綜合分析得出改性載體材料具有良好的超順磁性、較好的熱穩(wěn)定性，且晶體結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變。均勻分布的磁性納米微球的粒徑值為207.7 nm。
　　3、以傳統(tǒng)交聯(lián)劑戊二醛制備的磁性載體Fe3O4-PDA-GA為對(duì)照組，在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面分析法(RSM)對(duì)固定化脂肪酶的工藝條件進(jìn)行進(jìn)一步的優(yōu)化。脂肪酶最佳固定化條件為:以Fe3O4-PDA-DAS為固定化載體時(shí)，pH=7.5、載酶量為2.2 m