不同地區(qū)金銀花品質(zhì)評價及其有機(jī)酸提取富集工藝研究.pdf

1、金銀花(Lonicerae japonicae Flos)為忍冬科忍冬屬植物忍冬及同屬植物的干燥花蕾，是一種藥食同源類植物，在全國分布較為廣泛?，F(xiàn)代研究表明，金銀花具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗內(nèi)毒素、降血脂和清熱解毒等多種藥理活性。金銀花提取液已被廣泛應(yīng)用于多種中藥配方及具有功能性的食品中，如雙黃連注射液，金銀花口含片、王老吉涼茶、和其正涼茶等。有機(jī)酸類天然產(chǎn)物是金銀花中的主要成分，具有非常好的生物活性，同時其也是評價金銀花品質(zhì)的重要指標(biāo)

2、。本論文一方面對三個主要種植金銀花地區(qū)的金銀花樣品進(jìn)行了品質(zhì)評價研究，包括總酚和總黃酮含量測定、不同抗氧化方法抗氧化能力、主要化學(xué)成分含量測定等;另一方面本論文還對金銀花中五種重要的有機(jī)酸類成分進(jìn)行了高效提取富集工藝的研究，建立了一套快速簡便的色譜分析檢測方法和高效的提取工藝。本論文為合理、高效的利用金銀花植物資源提供了理論指導(dǎo)，為我國金銀花資源的深度開發(fā)提供了數(shù)據(jù)支持。本論文的主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.建立了HPLC快速

3、檢測金銀花中綠原酸、咖啡酸、3，5-二咖啡?？崴?、3，4-二咖啡?？崴峒?，5-二咖啡酰奎尼酸的方法:
　　色譜柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm I.D.，5μm);流動相:0.1％(v/v)乙酸水溶液(A)-0.1％(v/v)乙酸乙腈:0.1％(v/v)乙酸甲醇，3∶1(v/v)溶液(B);梯度洗脫條件:0-5 min,2-8％ B;5-15 min,8-12％ B;15-30 min,12-15％

4、 B;30-35 min,15-21％ B;35-46 min,21-24％ B;46-52 min,24％ B;52-66 min,24-36％ B;66-70min，36-100％ B;70-75 min，100％B。流速:1mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:320 nm;進(jìn)樣量:5μL。
　　2.通過對不同地區(qū)金銀花樣品進(jìn)行總酚和總黃酮含量、不同抗氧化方法抗氧化能力和主要成分含量的測定，進(jìn)行金銀花樣品品質(zhì)評價研究。

5、>　　山東金銀花樣品總酚總黃酮含量最高分別為137.520±3.15 GAE mg/g，0.656±0.022 RE mg/g;在DPPH自由基清除實驗中，河南樣品對DPPH自由基的清除能力最弱其IC50值為0.336±0.023 mg/mL，山東平邑樣品對DPPH自由基的清除能力最高IC50值為0.211±0.028 mg/mL;在ABTS總抗氧化能力測定實驗中，河北巨鹿表現(xiàn)出較高的抗氧化能力;在鐵還原力、FRAP實驗中，山東平邑樣品

6、均表現(xiàn)出較好的抗氧化結(jié)果;綠原酸和3，5-二咖啡?？崴岬暮渴墙疸y花樣品中含量最高的兩種活性物質(zhì)，山東平邑樣品擁有有機(jī)酸類成分含量相對較多，綜合以上實驗結(jié)果，山東平邑金銀花樣品品質(zhì)相對較佳。
　　3.對綠原酸、咖啡酸、3，4-二咖啡酰奎尼酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸及4，5-二咖啡?？崴嵛⒉ㄝo助低共熔溶劑提取工藝參數(shù)進(jìn)行了Box-Behnken(BBD)實驗設(shè)計工藝優(yōu)化，確定了最優(yōu)的提取參數(shù)，同時采用大孔吸附樹脂對目標(biāo)化合物進(jìn)行

7、富集分離。
　　低共熔溶劑:體系1.3-丁二醇/氯化膽堿
　　組成比例摩爾比6∶1
　　含水量10％
　　微波提取工藝參數(shù):提取溫度60℃
　　液固比9∶1 mL/g
　　提取時間20 min
　　在上述優(yōu)化條件下進(jìn)行驗證實驗，綠原酸、咖啡酸、3，4-二咖啡?？崴?、3，5-二咖啡酰奎尼酸及4，5-二咖啡?？崴崞骄崛÷史謩e為26.07±1.25，0.148±0.007，0.930±0.018