東海海域具潛在應(yīng)用價(jià)值的微生物篩選與鑒定.pdf

1、海洋蘊(yùn)藏著非常豐富的微生物資源，由于海洋環(huán)境非常特殊，使得海洋微生物能夠產(chǎn)生許多結(jié)構(gòu)新穎的物質(zhì)，這些物質(zhì)具有特殊的活性。對(duì)海洋微生物資源的調(diào)查對(duì)今后開發(fā)微生物資源具有重要的指導(dǎo)意義。
　　 對(duì)東海海域東經(jīng)120°到123°，北緯28°到31°范圍內(nèi)共采集海水樣品14個(gè)，海底沉積物樣品10個(gè)。海底沉積物采樣深度20m到260m，海水采樣深度2m到5m。平板稀釋法分離海洋微生物，實(shí)驗(yàn)表明培養(yǎng)基的組成和培養(yǎng)條件對(duì)海洋微生物的生長(zhǎng)及活性

2、物質(zhì)的產(chǎn)生都有影響。14個(gè)海水樣品中，共分離出1260株細(xì)菌;10個(gè)海洋沉積物樣品中，共分離出1151株細(xì)菌，168株真菌。
　　 根據(jù)菌落形態(tài)特征，將純培養(yǎng)菌株歸隸為19個(gè)編號(hào)（海水樣品）和76個(gè)編號(hào)（海洋沉積物樣品）。利用個(gè)體形態(tài)，結(jié)合生理生化實(shí)驗(yàn)和16S rRNA技術(shù)對(duì)95個(gè)編號(hào)的細(xì)菌進(jìn)行進(jìn)一步鑒定和系統(tǒng)發(fā)育分析，評(píng)估其多樣性情況。16S rRNA系統(tǒng)發(fā)生學(xué)分析表明，海水樣品中分離出來(lái)的細(xì)菌多數(shù)為嗜鹽單孢菌屬（Halomo

3、nas）的種類。海洋沉積物樣品中分離出來(lái)的細(xì)菌種類多樣性明顯，它們分別屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)（47株），鹽單胞菌屬（Halomonas）（5株），短桿菌屬（Brevibacterium）（3株），希瓦氏菌屬(Shewanella)(3株)，假單胞菌屬（Pseudomonas）（4株），泛生菌屬（Pantoea）（1株），迪茨菌屬（Dietzia）（1株），動(dòng)性球菌屬（Planococcus）（1株），海洋芽孢桿菌屬（Mari

4、nibacillus）（2株），Sphingopyxis（1株），Salegentibacter（2株），玫瑰桿菌屬（Roseobacter）(3株)，F(xiàn)lexibacter（1株），Hoeflea（1株）。其中有47株是屬于芽孢桿菌屬，占鑒定菌株的62％，據(jù)此推測(cè)芽孢桿菌屬為東海海域海洋沉積物中的優(yōu)勢(shì)屬。而這47株芽孢桿菌屬中又鑒定出14個(gè)種，可見(jiàn)東海沉積物中芽孢桿菌的的種類具有多樣性和豐富性。
　　 以枯草芽孢桿菌（Baci

5、llus subtilis）、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginose)、產(chǎn)氣腸桿菌（Enterobacter aerogenes）、白色念珠菌（Candida albicans）作為指示菌，利用瓊脂塊法和牛津杯法對(duì)海水和海洋沉積物樣品分離出的95株細(xì)菌菌株抗菌性質(zhì)進(jìn)行篩選。結(jié)果顯示，有2株細(xì)菌具有明顯抗金黃色葡