冷水七抗類風(fēng)濕與瞿麥抗腫瘤活性成分研究.pdf

1、本文對(duì)冷水七抗類風(fēng)濕與瞿麥抗腫瘤活性成分進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分：
　　第一部分：冷水七抗類風(fēng)濕活性成分研究。冷水七（Impatiens pritzllii Hook. f.var.hupehensis Hook. f.）為鳳仙花科鳳仙花屬植物，是鄂西土家族常用民族藥，具有祛風(fēng)除濕，散瘀消腫之功效。民間將其用于治療類風(fēng)濕性疾患，療效甚佳。本文在前人研究基礎(chǔ)上，對(duì)冷水七抗類風(fēng)濕活性成分進(jìn)行了研究，獲得了預(yù)期研究結(jié)果。通過現(xiàn)代色

2、譜分離方法和波譜鑒定技術(shù)，從冷水七抗類風(fēng)濕有效物質(zhì)部位（正丁醇萃取物）中分離鑒定了14種化合物，分別為：2,6-二甲基-2-乙烯基-2,3,4,7-四氫惡庚因(1),1,3,6-三羥基-7-甲基-蒽醌(2),4-羥基苯甲醛(3),4-(3-甲氧基-4-羥基苯基)-2-丁酮(4),鬼臼毒素(5),7-羥基-6-甲氧基香豆素(6),α-菠甾醇(7)，α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)，刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷

3、(9),刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3′′′-乙?；鵠-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(10)，刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3′′′-乙?；鵠-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(11)，刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯-28-O-β-D-吡喃木糖-(1→4)-[3′′′-

4、乙酰基]-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(12)，刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(13)，刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸-28-O-β-D-吡喃木糖(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖苷(14)。其中化合物1,10,11,12為新化合物，化合物2~6,13,14為首次從冷水七中分離得到

5、。構(gòu)建了T淋巴細(xì)胞篩選模型，對(duì)冷水七抗類風(fēng)濕有效物質(zhì)部位中分離得到6種皂苷化合物進(jìn)行了抑制T淋巴細(xì)胞增殖作用研究。研究結(jié)果表明，6種皂苷化合物對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖均能產(chǎn)生抑制作用，其藥物濃度在5μg-100μg/ml之間呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系，隨藥物濃度增大其抑制作用增強(qiáng)。在藥物濃度為80μg/ml的情況下，化合物9，10,11,12，13,14等6種皂苷對(duì)T淋巴細(xì)胞的抑制率分別為22.26％，32.74%，36.83%，27.93%，37.92

6、%，均顯示不同程度的藥效作用。從冷水七抗類風(fēng)濕有效物質(zhì)部位分離鑒定了14種化合物，其中4種為新化合物，8種化合物為首次從該植物發(fā)現(xiàn)；抑制T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果表明，6種皂苷化合物均具有良好藥效作用，其中5種皂苷化合物為首次發(fā)現(xiàn)具有抑制T淋巴細(xì)胞增殖作用。這對(duì)于詮釋冷水七抗類風(fēng)濕的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)具有重要意義，并為該民族藥的開發(fā)利用提供了一定科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　第二部分：瞿麥抗腫瘤活性成分研究。瞿麥（Dianthus superbus

7、L.）為石竹科植物，是傳統(tǒng)中藥，收載于歷年版《中國(guó)藥典》一部，其功效甚多，能起到通淋利尿的作用，除此以外還有活血通經(jīng)等作用；根據(jù)文獻(xiàn)研究中顯示，瞿麥提取物具有明顯抗腫瘤藥效作用。本論文在前期研究基礎(chǔ)上，對(duì)瞿麥抗腫瘤活性成分進(jìn)行了研究，獲得了較好的研究結(jié)果。通過中藥化學(xué)、分子生物學(xué)、分析化學(xué)等學(xué)科交叉的研究方法，在抗腫瘤生物活性指導(dǎo)下，對(duì)瞿麥抗腫瘤活性成分進(jìn)行跟蹤研究。采用溶劑法將瞿麥提取分離為不同物質(zhì)部位，抗腫瘤活性篩選出有效物質(zhì)部位；

8、采用色譜分離方法將主要有效物質(zhì)部位分離為8個(gè)組分，活性篩選獲得多個(gè)有效組分；從主要有效組分進(jìn)一步分離純化得到單體成分，該成分采用波譜技術(shù)鑒定為積雪草酸（Asiatic acid，2α，3β，23α-三羥基-熊果-12-烯-28-酸），MTT法測(cè)定積雪草酸抗腫瘤生物活性，其對(duì)B el-7402腫瘤細(xì)胞具有顯著抑制作用。從瞿麥中發(fā)現(xiàn)抗腫瘤活性顯著的有效成分積雪草酸，這對(duì)于詮釋該傳統(tǒng)中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)具有重要意義，并可望為研制抗腫瘤化學(xué)藥物提供目