IL-17在大鼠不同牙周狀態(tài)壓力側(cè)牙槽骨中的表達(dá)和作用機(jī)制的初探.pdf

1、背景和目的:
　　牙齒移動是通過對牙齒施加一定的矯治力將應(yīng)力傳遞到相應(yīng)的牙周組織，引起牙槽骨發(fā)生適應(yīng)性骨改建的過程。壓力側(cè)牙槽骨的骨組織在機(jī)械壓力和血流改變引起的低氧刺激作用下發(fā)生骨吸收，使牙齒產(chǎn)生移動，最后達(dá)到矯治目的。2005年第三次全國口腔健康流調(diào)結(jié)果顯示，我國成年人70％～90％患有不同程度的牙周炎，隨著口腔保健意識的提升、正畸學(xué)和牙周病學(xué)的發(fā)展，正畸-牙周聯(lián)合治療已經(jīng)成為治療錯合畸形伴牙周炎患者的常規(guī)治療方法。但是牙周炎

2、患者牙齒的移動更易造成牙槽骨的損傷，因此我們提出疑問，對于經(jīng)過牙周序列治療后需要正畸治療的患者，正畸力是否有利于牙槽骨改建？目前在臨床上缺乏評估牙周炎患者正畸牙移動過程中牙周組織改建的檢測指標(biāo)，極大的束縛了正畸醫(yī)師的治療。
　　骨代謝動態(tài)平衡是骨改建的基礎(chǔ)，由破骨細(xì)胞(Osteoclast，OC)介導(dǎo)的骨吸收和成骨細(xì)胞(Osteoblast，OB)介導(dǎo)的骨形成組成。OC作為骨改建的起始因素，它的數(shù)量與活性決定骨改建的進(jìn)程及最終結(jié)果

3、。RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)是調(diào)節(jié)OC分化和骨吸收的信號傳導(dǎo)通路。核因子κB受體活化因子配體（Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand，RNAKL）與OC表面受體核因子κB受體活化因子(Receptor activator of nuclear factor kappa-B，RNAK)相結(jié)合，促進(jìn)OC形成和分化，導(dǎo)致骨吸收。骨保護(hù)蛋白(osteoprotegerin，O

4、PG)是RANK的誘餌受體，可競爭性的與RANKL結(jié)合，抑制OC生成和骨吸收。所以，骨中RANKL與OPG的相對濃度是骨量和強(qiáng)度的主要決定因素。
　　正畸牙移動是周期性牙周膜改建和骨組織重塑的過程，同時也是非感染性、微創(chuàng)傷性的炎癥反應(yīng)過程。目前研究認(rèn)為決定炎癥發(fā)展方向的是免疫反應(yīng)。IL-17通過炎癥介導(dǎo)和骨破壞作用參與牙周炎的發(fā)生發(fā)展過程。但在牙周炎患者的正畸牙移動過程中，IL-17的表達(dá)和作用鮮有報道。
　　基于IL-17

5、對骨代謝的重要調(diào)節(jié)作用，本論文通過建立大鼠在正常和炎性牙周狀態(tài)下的正畸牙移動模型，分析IL-17在不同牙周狀態(tài)壓力側(cè)牙槽骨中的表達(dá)，并探究正畸力和炎癥的雙重作用下壓力側(cè)牙槽骨組織改建的分子機(jī)制。擬了解成人牙周炎患者牙周治療后對正畸力的反應(yīng)、壓力側(cè)牙槽骨的改建，探討成人牙周炎患者正畸治療過程中牙齒移動的特點(diǎn)，并為牙周炎患者的正畸治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:
　　64只8周齡雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成4組，分別為空白對

6、照組（A組）、加力組（B組）、炎癥組（C組）、炎性加力組（D組）。B組用鎳鈦拉簧50g力近中移動大鼠右側(cè)上頜第一磨牙。C、D組通過牙齦剝離+絲線結(jié)扎+高糖飼養(yǎng)建立牙周炎模型，C組建模后去除上述因素并清理干凈。D組則去除上述因素后用鎳鈦拉簧50g力近中移動大鼠右側(cè)上頜第一磨牙。并分別于加力0，3，7，14天處死。其中16只用于組織形態(tài)學(xué)觀察，確定模型建立成功，24只用于qRT-PCR檢測各組IL-17 mRNA以及D組RANKL、OPGm

7、RNA表達(dá)，24只用于WesternBlot檢測各組IL-17蛋白及D組RANKL、OPG蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床觀察結(jié)果:正常大鼠牙齦呈有光澤的粉紅色，邊緣菲薄，質(zhì)地堅韌。絲線結(jié)扎4W后，絲線上有大量的軟垢和食物殘渣;去除絲線后，牙齦暗紅色，質(zhì)地松軟，探診出血。加力3天后，大鼠上頜第一磨牙和第二磨牙之間出現(xiàn)間隙，上頜第一磨牙近中移動。加力14天，移動距離最大。以上表明大鼠正畸牙移動模型、實驗性牙周炎模型和牙周

8、炎大鼠正畸牙移動模型成功建立。
　　(2) HE染色結(jié)果: A組牙周膜纖維排列規(guī)則，牙槽骨表面較平整。B組加力第3，7天，壓力區(qū)牙周間隙變窄，牙周纖維排列紊亂，張力區(qū)牙周間隙變寬;加力第14天，壓力區(qū)OC數(shù)量減少，張力區(qū)新骨沉積。C組建模后0天后，可見炎性細(xì)胞浸潤，牙槽嵴頂高度降低。建模后第3，7，14天，炎癥逐漸消退。D組破骨最為活躍。
　　(3)qRT-PCR和Western Blot結(jié)果:與A組相比，C組牙槽骨中IL-

9、17 mRNA水平呈現(xiàn)高表達(dá)，且隨時間延長而降低，第14天能達(dá)到正常水平。在正常和炎性牙周組織狀態(tài)下，正畸力誘導(dǎo)IL-17在壓力側(cè)牙槽骨中的表達(dá)變化隨加力時間延長呈規(guī)律性變化，先升高后降低，第7天達(dá)峰值。在炎性狀態(tài)下牙槽骨中IL-17mRNA水平呈現(xiàn)更高表達(dá)。各實驗組IL-17蛋白表達(dá)趨勢同IL-17 mRNA表達(dá)變化基本一致。D組壓力側(cè)牙槽骨中RANKLm砌、『A以及RANKL/OPG比值隨加力時間延長而變化的趨勢與IL-17mRNA

10、的表達(dá)趨勢基本一致。RANKL和OPG蛋白表達(dá)變化和RANKL、OPGmRNA表達(dá)變化一致。
　　結(jié)論:
　　(1) IL-17在正常及炎性牙槽骨中存在，并參與正常及炎性牙周組織狀態(tài)下正畸牙移動過程中壓力側(cè)牙槽骨改建。
　　(2)在炎性牙周組織中，正畸力可以誘導(dǎo)IL-17mRNA釋放增加，炎癥化學(xué)信號和機(jī)械力產(chǎn)生協(xié)同作用使得炎癥效應(yīng)疊加，影響壓力側(cè)牙槽骨改建。
　　(3) IL-17可能通過RANKL/RANK/