白藜蘆醇對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠抗炎免疫作用及其部分機制探討.pdf

1、目的：通過形態(tài)學、免疫學、分子生物學等方法研究白藜蘆醇(resveratrol)對佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠在抗炎免疫功能方面的調(diào)節(jié)作用,探討白藜蘆醇對AA大鼠治療作用和有關(guān)機制。
　　方法：50只SD大鼠隨機分為2組:正常對照組(10只),模型組(40只)。模型組在足趾皮下注射弗氏完全佐劑(Freund's complete adjuvant,FCA)誘導關(guān)節(jié)炎12d,在其足趾出現(xiàn)繼發(fā)性免疫炎

2、癥反應時,將40只模型組大鼠又每10只隨機分成以下4組:模型對照組、白藜蘆醇低劑量組(5mg·kg-1)、白藜蘆醇高劑量組(15mg·kg-1)、陽性對照雷公藤多甙組(100mg·kg-1)。大鼠每天均灌胃給藥(intragastric injection administration,ig),給予溶媒或藥物,以關(guān)節(jié)腫脹度、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)等改變評價大鼠AA模型的建立情況和白藜蘆醇對AA大鼠的保護作用;持續(xù)16d后處死5組大鼠;關(guān)節(jié)的滑

3、膜組織和滑膜下軟骨組織用HE染色觀察結(jié)構(gòu)改變;關(guān)節(jié)滑膜細胞超微結(jié)構(gòu)的改變用電子顯微鏡觀察,以了解滑膜細胞分泌功能和形態(tài)學的變化;免疫組化方法檢測滑膜組織、滑膜下軟骨組織的基質(zhì)金屬蛋白酶1(matrix metalloproteinases1,MMP-1)及組織抑制劑性金屬蛋白酶(tissue inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)在滑膜組織中的表達;滑膜組織勻漿,Western blot檢測MM

4、P-1、TIMP-1蛋白含量。腹腔灌洗法提取、培養(yǎng)巨噬細胞,通過放射免疫方法檢測白藜蘆醇對AA模型大鼠腹腔巨噬細胞(peritoneal macrophage,PMΦ)分泌IL-1β、TNF-α的情況。
　　結(jié)果：白藜蘆醇(5,15mg·kg-1,ig)明顯降低了AA模型大鼠繼發(fā)性足腫脹度,顯著減輕了 AA模型大鼠多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)。HE染色顯示白藜蘆醇(5,15mg·kg-1)明顯減輕了AA模型大鼠繼發(fā)性踝關(guān)節(jié)水腫和炎細胞浸潤,減

5、少血管翳形成;白藜蘆醇(15 mg·kg-1)使得AA模型大鼠具有分泌功能滑膜細胞中高爾基體、粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體的形態(tài)異常恢復;免疫組化顯示模型組滑膜組織MMP-1、TIMP-1高表達,白藜蘆醇治療組能抑制MMP-1、TIMP-1的高表達,在抗關(guān)節(jié)炎的作用上有相關(guān)性;白藜蘆醇(5,15mg·kg-1)能明顯抑制AA大鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生過高的IL-1β、TNF-α。
　　結(jié)論：白藜蘆醇可改善AA模型大鼠關(guān)節(jié)腫脹度、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎指數(shù)