鄰苯二甲酸酯優(yōu)勢降解菌的篩選及復合菌群的構建.pdf

1、用鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）作為唯一的碳源和能源，從鎮(zhèn)江京口區(qū)污水處理廠的活性污泥和鄭州市綜合垃圾處理廠的垃圾滲濾液中篩選出了四株DBP高效降解菌：YB-1、YB-2、YB-3和YB-4。通過生理生化實驗和16S rDNA序列分析初步鑒定YB-1、YB-2、YB-3和 YB-4分別為伯克霍爾德菌屬（ Burkholderia sp.）、金黃桿菌屬（Chryseobacterium sp.）、門多薩假單胞菌（Pseudomonas men

2、docina）和銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。對菌株YB-3進行PCR擴增及克隆，獲得了1個930 bp的DNA片段，測序結果顯示該片段與Pseudomonas mendocinaymp的鄰苯二甲酸雙加氧酶基因的核苷酸序列相似性為100％。
　　考察了初始底物濃度、菌液投加量、pH值、溫度和鹽質量濃度等因素對菌株降解效率的影響。結果表明，四株DBP高效降解菌的最佳生長與降解條件是：底物的濃度400

3、mg/L、菌液投加量10%（v/v）、pH為7.0、培養(yǎng)溫度30℃、鹽質量濃度在2%以內。在最佳培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)5 d后，四株降解菌YB-1、YB-2、YB-3和YB-4對DBP的降解率分別可達73.85%、58.56%、82.04%和76.22%。菌株的廣譜性實驗顯示四株菌都具有較寬的降解譜,它們均能有效降解鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)

4、和鄰苯二甲酸二辛酯(DNOP)這五種常見的PAEs作為代謝基質。
　　本篩選出的四株DBP（鄰苯二甲酸二丁酯）高效降解菌與本實驗室曾經篩選得到的三株鄰苯二甲酸二（2-乙基己基酯（DEHP）高效降解菌進行配伍組合，得到一個PAEs高效復合菌群A。利用復合菌群A對不同濃度的混合PAEs進行降解，結果表明：復合菌群A能夠很好地降解高濃度的混合PAEs，當混合PAEs濃度達到400 mg/L時，菌群A的生長狀況和對混合PAEs（鄰苯二甲酸

5、酯）的降解情況達到最佳狀態(tài)；菌群A對五種PAEs的降解能力也有差別，對PAEs的降解能力由高到低依次為：DMP＞DEP＞DBP＞DEHP＞DNOP。
　　考察了外加碳源和氮源以及表面活性劑對菌群A降解能力的影響，結果表明：當吐溫80的濃度為150 mg/L時，可使菌群A在連續(xù)培養(yǎng)7 d后對PAEs的降解率由83.61%提高到96.22%；葡萄糖與酵母粉也是很理想的碳源與氮源，可使菌群A對混合PAEs的平均降解率分別達到94.44%