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1、【目的】:建立哮喘小鼠模型,選用氯化高鐵血紅素(hemin)干預(yù)血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表達(dá),探討HO-1在哮喘氣道炎癥中的抗炎及其對(duì)T輔助細(xì)胞(T helper cells,Th)1、Th2、Th17和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg)的調(diào)節(jié)作用。
【方法】:用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、激發(fā)Balb/C小鼠制備哮喘動(dòng)物模型,并經(jīng)hemin誘導(dǎo)
2、HO-1高表達(dá)。通過肺臟組織病理分析,血清OVA特異性IgE水平測(cè)定,肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中炎癥細(xì)胞分類及計(jì)數(shù)以了解小鼠氣道炎癥變化;Western Blot和Real-time PCR分別測(cè)定肺臟和脾臟組織中HO-1基因表達(dá)和蛋白水平,肺臟組織Th1、Th2、Th17及Treg分泌的相關(guān)細(xì)胞因子和特異性轉(zhuǎn)錄因子基因表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)分析脾臟各CD4+T細(xì)胞亞群。
3、> 【結(jié)果】:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)致敏、激發(fā)后(OVA組),小鼠肺臟和脾臟HO-1表達(dá)較Control組增高,hemin干預(yù)后(OVA+Hemin組),HO-1蛋白表達(dá)進(jìn)一步升高;肺臟病理組織學(xué)顯示,OVA組見以EOS為主的大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),而hemin干預(yù)后能明顯緩解炎癥;OVA組肺組織中T-bet及IFN-γ水平降低,但GATA-3和RORγt表達(dá)及IL-4、IL-17A和IL-6分泌水平較Control組顯著增高,而hemin能逆轉(zhuǎn)
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