球等鞭金藻抑制物的分離提取及其對藻的生理影響.pdf

1、在微藻的高密度培養(yǎng)過程中，特別是培養(yǎng)后期，細胞間存在著顯著的相互抑制現(xiàn)象，我們在球等鞭金藻的培養(yǎng)過程中也發(fā)現(xiàn)了這種現(xiàn)象。進一步的研究表明，除光照、溫度、pH、通氣量及營養(yǎng)限制因素以外，球等鞭金藻自身產(chǎn)生抑制物也是影響其生長的重要因素。本論文圍繞抑制物進行了分離提取及其對藻的生理影響等方面進行了如下研究： 1. 對老化的球等鞭金藻培養(yǎng)液進行無細胞處理后，在光照、通氣量不受限制，營養(yǎng)充分的條件下，重新進行該藻培養(yǎng)，結(jié)果表明球等鞭金藻

2、在生長過程中的確可產(chǎn)生某種抑制物，該抑制物是在生長過程中逐漸釋放到培養(yǎng)液中，至細胞衰亡期(25d)時含量足以使游動細胞轉(zhuǎn)化為不動細胞并使得生長速率迅速減??；此外，該抑制物對其自身藻細胞的生長、葉綠素a、胞內(nèi)多糖和蛋白質(zhì)有明顯的抑制效果，且胞外老化液老化程度越大，抑制效果越明顯。 2. 利用球等鞭金藻老化液對鹽藻、扁藻、三角褐指藻、纖細角毛藻、小球藻和新月菱形藻等幾種海洋微藻進行了培養(yǎng)，結(jié)果表明，金藻產(chǎn)生的抑制物對這些微藻細胞的培

3、養(yǎng)密度，蛋白質(zhì)、多糖、葉綠素含量以及氮磷的吸收均有一定的影響。 3. 利用萃取、柱層析、薄層層析等方法對該抑制物進行了分離純化和提取工藝研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該抑制物有良好的熱穩(wěn)定性、極性較大，所得最佳提取工藝為：萃取溶劑乙酸乙酯，提取pH2.4～3，蒸干乙酸乙酯溫度40℃。 4. 對粗提物作進一步的柱層析和薄層層析，最終得到了一種較純的抑制物組分，該組分在高效液相圖譜中保留時間為4.872±0.005min 的峰對應(yīng)。

4、 5. 采用正交實驗擬水平設(shè)計法，研究半連續(xù)培養(yǎng)中氮、磷濃度，更新率和更新周期對球等鞭金藻的細胞產(chǎn)率、細胞總采收量、DHA 產(chǎn)率和DHA 總采收量的影響。結(jié)果表明獲得最大細胞產(chǎn)率的培養(yǎng)條件是：NO3--N濃度為11.5mg/L，PO43--P濃度為1.1mg/L，更新率為0.20，更新周期為1d，而獲得最大DHA產(chǎn)率的培養(yǎng)條件是，NO3--N濃度為11.5mg/L，PO43--P濃度為0.7mg/L，更新率為0.20，更新周期為1d。