油菜菌核病拮抗菌株的篩選、鑒定及生防作用研究.pdf

1、油菜菌核病是由核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起的一種重要病害，對(duì)我國(guó)油菜的安全生產(chǎn)照成了巨大的影響。目前，油菜菌核病的防治方法主要有農(nóng)業(yè)防治、化學(xué)防治和生物防治，由于農(nóng)業(yè)防治的操作方法繁瑣、收到的效果欠佳，而化學(xué)防治會(huì)污染環(huán)境、使植株殘留有毒物質(zhì)，從而導(dǎo)致生物防治受到人們的青睞。篩選具有生防潛力的油菜菌核病拮抗菌株，可以有利于尋找新的生防菌株并為設(shè)計(jì)新的控制策略提供好的想法。因此，本研究從篩選高效拮抗菌株的

2、基礎(chǔ)上，對(duì)4株高效的拮抗菌株進(jìn)行了室內(nèi)平板試驗(yàn)和油菜活體試驗(yàn)來(lái)測(cè)定其對(duì)油菜菌核病菌的抑菌效果，并對(duì)抑菌效果最佳的BX-7進(jìn)行了抗菌譜分析和鑒定，主要研究結(jié)果如下：
　　1.從油菜試驗(yàn)田中采集油菜根圍土壤，通過(guò)平板稀釋法分離出156株細(xì)菌菌株，經(jīng)平板對(duì)峙法篩選得到10株對(duì)油菜菌核病菌具有較好抑菌效果的拮抗菌株，命名為BX-1~BX-10，利用繼代培養(yǎng)測(cè)定抑菌效果復(fù)篩，選出4株遺傳穩(wěn)定性較好的菌株BX-1、BX-3、BX-4和BX-7

3、，其中菌株BX-7的抑菌效果最佳，抑菌活性最穩(wěn)定性。
　　2.通過(guò)平板對(duì)峙試驗(yàn)測(cè)定菌株BX-1、BX-3、BX-4和BX-7對(duì)油菜菌核病菌NGB4的抑制率分別為68.18％、67.72%、50.00%、77.27%。顯微觀察發(fā)現(xiàn)，與菌株BX-7對(duì)峙培養(yǎng)的菌核病菌菌絲發(fā)生變色，斷裂，畸形等現(xiàn)象。
　　3.測(cè)定了菌株BX-1、BX-3、BX-4和BX-7的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)油菜菌核病菌的抑菌效果。結(jié)果顯示：BX-1和BX-7的無(wú)菌發(fā)酵

4、液對(duì)菌核病菌具有抑制作用，而BX-3和BX-4的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)菌核病菌無(wú)抑制作用；菌株BX-1和BX-7的培養(yǎng)96h的無(wú)菌發(fā)酵液的抑制效果最佳，對(duì)油菜菌核病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率達(dá)到了17.86%和72.04%；菌株 BX-7的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)油菜菌核病菌的菌絲生長(zhǎng)和菌核形成的抑制效果隨無(wú)菌發(fā)酵液濃度的減少而降低。
　　4.測(cè)定了菌株BX-1、BX-3、BX-4和BX-7揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)油菜菌核病菌的抑菌效果。結(jié)果顯示：菌株BX-1和BX-7的

5、揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)油菜菌核病菌的菌絲生長(zhǎng)具有較好的抑制作用，在培養(yǎng)48h后菌株 BX-1和BX-7對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率分別為55.33%和74.09%；而菌株BX-3和BX-4的揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)油菜菌核病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用不顯著。
　　5.測(cè)定了菌株BX-1、BX-3、BX-4和BX-7對(duì)油菜菌核病的離體葉片防效，并通過(guò)盆栽試驗(yàn)驗(yàn)證菌株BX-7的活體防效。結(jié)果顯示：菌株BX-1和BX-7的菌懸液及無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)油菜菌核病菌的抑菌效果極佳，對(duì)照

6、葉片嚴(yán)重發(fā)病，而處理葉片未發(fā)病，其防效均達(dá)到了100%；菌株BX-3和BX-4的菌懸液對(duì)油菜菌核病菌均有一定的抑制作用，對(duì)照葉片嚴(yán)重發(fā)病，處理葉片輕微發(fā)病，其防效分別為73.12%和62.06%，而菌株BX-3和BX-4的無(wú)菌發(fā)酵液處理的葉片發(fā)病嚴(yán)重，對(duì)油菜菌核病菌無(wú)明顯的抑菌效果。菌株BX-7的菌懸液及無(wú)菌發(fā)酵液能夠有效降低葉片發(fā)病率，菌懸液的防治效果要顯著優(yōu)于無(wú)菌發(fā)酵液。結(jié)合室內(nèi)平板試驗(yàn)和油菜活體試驗(yàn)，驗(yàn)證了菌株BX-7對(duì)油菜菌核病