油菜抗除草劑及抗菌核病突變體在油菜無性系中的篩選及其檢測.pdf

1、分類號(hào)UDC密級(jí)Y932195單位代碼!逝3Z湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文油菜抗除草劑及抗菌核病突變體在油菜無性系中的篩選及其檢測InvitroscreeningstemrotandherbicideresistantmaterialSinBrassicanapusLanditsidentificatiOil研究生姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向提交論文日期答辨委員會(huì)主席學(xué)位授予日期—攀睢蔫竭：奎葑宜：壹亟熬援佳塹裁蟹堂與筮佳堂一漁墓擅性塞變體

2、的籃選一論支答辯日期塑埴且!女論文評(píng)闊人—jk霉—溯二oo六年五月摘要油菜菌核病是世界范圍的一種主要病害，對(duì)油菜生產(chǎn)造成嚴(yán)重的影響，油菜抗菌核病品種的選育是目前油菜育種的一個(gè)重要內(nèi)容，同時(shí)培養(yǎng)抗除草劑作物又是解決目前農(nóng)業(yè)勞動(dòng)力成本增加和環(huán)境污染的有力手段。本研究以不同劑量的co”一Y射線對(duì)湘油15種子進(jìn)行誘變處理，處理后的種子利用毒素Basra和草酸作為選擇壓力，采用多步正篩選系統(tǒng)，進(jìn)行抗病突變體篩選，希望能創(chuàng)建抗菌核病、抗除草劑的油菜

3、育種材料。本研究做了以下工作并取得了相關(guān)結(jié)果：1首先將湘油15的種子進(jìn)行輻照誘變，發(fā)現(xiàn)10至12萬倫琴的輻照劑量為較適合的誘變劑量。并利用草酸篩選抗草酸材料，最后從耐30mmol／L濃度草酸的油菜中篩選出K6，K7，K8，K9號(hào)等幾株對(duì)菌核病菌有很強(qiáng)的抗性的油菜苗。2利用除草劑草銨膦(Basta)為篩選壓，篩選出NO5、6、7、8、9、10、11、12、13、18等10株抗009％除草劑Basta的油菜苗。并利用打孔葉片抗除草劑鑒定、除

4、草劑噴灑鑒定、谷氨酰胺合成酶的活性測定等方法確定其抗性。3為了得到較好的SRAP檢測的反應(yīng)條件，本研究對(duì)油菜SRAP反應(yīng)體系的模板、dNTP等進(jìn)行了優(yōu)化研究，結(jié)果表明25uL反應(yīng)體系中，dNTP最佳濃度為02mM；引物濃度為10uM；Taq酶為2OU；模板量最佳為15ng。并且利用SRAP方法對(duì)4株抗除草劑變異株及對(duì)照進(jìn)行分子標(biāo)記和遺傳突變的研究25對(duì)引物中2對(duì)引物擴(kuò)增出明顯的多態(tài)性，本研究建立的油菜SRAP體系重復(fù)性好?！娟P(guān)鍵詞】油菜