油菜菌核病菌致病力分化及油菜對菌核病抗性生化機(jī)制研究.pdf

1、油菜菌核病在世界油菜生產(chǎn)國和地區(qū)均有分布。在我國也有發(fā)生，位于油菜三大病害之首，尤其以長江流域和東南沿海地區(qū)最為普遍和嚴(yán)重，嚴(yán)重影響了油菜產(chǎn)量和品質(zhì)。本論文以采集于安徽不同市縣的24株油菜菌核病菌株為供試菌株，以甘藍(lán)型油菜皖油14號為供試油菜品種，采用離體葉片法測定油菜菌核病的致病力，并對不同致病力菌株進(jìn)行生物學(xué)特性的比較；選用抗菌核病油菜品種德油5號、中油821和感病品種皖油14、雜優(yōu)1號為試驗材料，于盛花期接種發(fā)病后測定體內(nèi)的相關(guān)防

2、御酶的活性以及草酸含量變化，以明確其與抗病性的關(guān)系，探討油菜品種抗油菜菌核病的生化機(jī)制，主要結(jié)果如下：
　　 1、不同地區(qū)的油菜菌核病菌致病性分化及生物學(xué)特性比較
　　 從安徽省各地采集菌核，分離鑒定并選取其中的24株菌株作為供試菌株，采用離體葉片接種法接種測定菌株對供試油菜的致病力。并從中選取致病力較強(qiáng)，較弱兩個菌株進(jìn)行生物學(xué)特性的比較。結(jié)果表明各菌株間的致病力有明顯的差異，存在著明顯分化，這種致病性差異與菌株的地理來

3、源有很大的聯(lián)系，但并不完全相關(guān)，任何一個地區(qū)都有致病性強(qiáng)和弱的菌株；該菌在5～30 ℃條件下均能生長,最適生長溫度為20～25℃，菌絲在pH 2～12均能生長，以pH 5～7為最適，在光照和黑暗交替的條件下有利于菌絲的生長；強(qiáng)致病力菌株在各個溫度、pH和光照條件下菌絲的生長均大于弱致病力菌株。
　　 2、油菜菌核病菌侵染油菜后多酚氧化酶（PPO）活性的變化
　　 PPO與酚類底物接觸，酚類物質(zhì)被催化氧化生成醌類物質(zhì)，醌類

4、物質(zhì)再聚合成褐色產(chǎn)物，導(dǎo)致組織褐變。采用分光光度計法測定產(chǎn)物的生成。結(jié)果表明：在菌核病影響下，抗、感病品種油菜的多酚氧化酶(PPO)活性有所改變，其活性在健全葉中，抗性品種明顯高于感病品種，與油菜抗性呈正相關(guān)，且多酚氧化酶(PPO)活性表現(xiàn)為感病品種增加幅度大于抗病品種。活性的變化與其抗病性強(qiáng)弱存在一定的相關(guān)性。
　　 3、油菜菌核病菌侵染油菜后超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化
　　 在有氧化物存在下，核黃素可被光還原

5、，被還原的核黃素在有氧條件下極易在氧化產(chǎn)生氧離子，它可將淡藍(lán)四唑（NBT）還原為藍(lán)色物質(zhì)，后者在560nm波長處有最大吸收值，而SOD可抑制此反應(yīng)。因此，可根據(jù)超氧化物歧化酶抑制NBT在光下的還原作用來確定酶活性大小。結(jié)果表明：在致病菌的影響下，抗、感病品種油菜的超氧化物歧化酶(SOD)的活性有所改變。其活性在健全葉中，抗性品種明顯高于感病品種，與油菜抗性呈正相關(guān)；接種后超氧化物歧化酶(SOD)活性表現(xiàn)為抗病品種增加幅度大于感病品種，活

6、性的變化與其抗病性強(qiáng)弱存在一定的相關(guān)性。
　　 4、油菜菌核病菌侵染油菜后過氧化物酶(POD)活性的變化
　　 在有過氧化氫存在下，過氧化物酶能使愈創(chuàng)木酚氧化，生成茶褐色物質(zhì)，可用分光光度計法測量470nm波長下的OD值變化，計算過氧化物酶的活性。結(jié)果表明：在菌核病影響下，抗、感病品種油菜的過氧化物酶(P0D)活性有所改變；過氧化物酶(POD)在健全葉中，抗、感病品種的酶活差異不明顯；接種后活性表現(xiàn)為抗病品種增加幅度大于

7、感病品種；植株活性變化與其抗病性強(qiáng)弱存在一定的相關(guān)性。
　　 5、油菜菌核病菌侵染油菜后草酸(oxalic acid)含量的變化
　　 高錳酸鉀滴定法的原理是草酸和高錳酸鉀之間可以進(jìn)行氧化反應(yīng)，用高錳酸鉀來滴定草酸，根據(jù)反應(yīng)物顏色來判斷反應(yīng)終點，按照反應(yīng)方程式和高錳酸鉀的用量來計算草酸的含量。結(jié)果表明：在菌核病影響下，抗、感病品種油菜的草酸(oxalicacid)含量均有所不同；草酸(oxalic acid)含量表現(xiàn)為感