油菜菌核病菌對多菌靈抗性的分子機(jī)制和分子檢測.pdf

1、本研究用50 mg/L和500 mg/L的多菌靈(MBC)，將取自安徽、江蘇、湖北三省的192個油菜菌核菌菌株分為對多菌靈敏感(MBC-S)、抗性(MBC-R)和高抗(MBC-HR)的三種類型。78個菌株在500 mg/L上能夠生長，它們被認(rèn)為是MBC-HR菌株；1個菌株在50 mg/L上生長良好，但在500 mg/L上不能生長，被認(rèn)為是MBC-R菌株；剩下的113個在50 mg/L上不能生長，被看做MBC-S菌株。 從這些菌株

2、中挑選了25個菌株測定它們對MBC、乙霉威(NPC)、撲海因、三唑酮和自克列五種藥的交互抗性。結(jié)果表明，MBC-HR菌株對MBC和NPC表現(xiàn)存在負(fù)交互抗性，MBC-R菌株對MBC和NPC都表現(xiàn)抗性，所有測定的菌株對其它三個藥表現(xiàn)敏感。對不同來源地的65個菌株遺傳多樣性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，抗性菌株具有不同的遺傳背景，表日月不同地區(qū)的抗性菌株來源于不同的親本。 對油菜菌核病菌的β-微管蛋白基因序列分析表明，MBC-HR菌株中β-微管蛋白1

3、98位氨基酸由野生的Glu(GAG)突變?yōu)锳la(GCG)，MBC-R菌株的200位氨基酸由野生的Phe(TTC)突變?yōu)門yr(TAC)，除了這些位點外，其它氨基酸沒有變化。 根據(jù)MBC-HR和MBC-R菌株中β-微管蛋白基因第198位和200位的密碼子的點突變，分別設(shè)計了兩對等位基因?qū)；疨CR引物RF-198+SR12和RF-200+SR12。結(jié)果表明，RF-198+SR12引物能從MBC-HR菌株中特異地擴(kuò)增出一條403-b