油菜菌核病菌對(duì)腐霉利的抗性及其機(jī)制.pdf_第1頁(yè)
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1、從江蘇省鎮(zhèn)江市和揚(yáng)州市采集病樣,分離獲得油菜菌核病菌168個(gè)菌株。依據(jù)32個(gè)野生菌株藥劑敏感性(EC50)頻率分布,菌株對(duì)腐霉利的敏.感基線測(cè)定為O.1981±0.02200μg/mL(EC50)和1.1±0.1595μg/mL(MIC)。以5μg/mL(MIC)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),未發(fā)現(xiàn)田間抗腐霉利菌株。通過(guò)紫外線和藥劑誘導(dǎo),獲得高抗腐霉利突變株(ECso>1000μg/mL)。經(jīng)轉(zhuǎn)管培養(yǎng)20次后,這些抗藥菌株抗性表現(xiàn)穩(wěn)定。 以腐霉利敏

2、感菌株YDll8及其誘變產(chǎn)生的抗性菌株YDll-4R、YDll-7R、YDllAR進(jìn)行比較研究,發(fā)現(xiàn)抗性突變株菌絲生長(zhǎng)較慢;對(duì)離體和田間植株的致病力較弱。但是,在一定濃度(0.5~21μg/mL)腐霉利處理后,敏感菌株菌絲扭曲,分支增加且短小,甚至細(xì)胞腫脹、破裂,原生質(zhì)外滲,而抗藥菌株菌絲形態(tài)則無(wú)明顯變化。 與敏感菌株相比,腐霉利抗性菌株無(wú)論在高糖(>40g/L蔗糖)還是高鹽(>5g/L NaCl)培養(yǎng)基上均對(duì)高滲透壓比較敏感,

3、并且菌絲相對(duì)電導(dǎo)率較高。這顯示抗腐霉利菌株細(xì)胞膜透性增大,胞內(nèi)電解質(zhì)滲出較多。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn),在含藥培養(yǎng)液中,腐霉利敏感菌株菌絲內(nèi)甘油大量合成和積累,增加462.45%,而抗性菌株菌絲內(nèi)甘油含量?jī)H稍有增加或有所下降。這表明抗腐霉利菌株對(duì)外界滲透壓的調(diào)節(jié)能力要低于敏感菌株。 根據(jù)已報(bào)道AaHKl序列設(shè)計(jì)特異引物,經(jīng)PCK擴(kuò)增和測(cè)序,獲得腐霉利敏感菌株YDlls和抗性菌株YDll-4R、YDll-7R、YDllAR組氨酸激酶基因保守區(qū)域

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