一：GKLF與食管癌分化的關(guān)系及其對分化相關(guān)基因Keratin 13的調(diào)控研究;二：P53和MDM2基因多態(tài)與食管癌遺傳易感性.pdf

1、一.細胞分化是一個基因選擇性表達的過程，不同類型細胞的增殖和分化是由特異性轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控的，在細胞癌變過程中基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)被打破，導致上皮細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。胃腸富集Krtippel樣因子(Gut-enriched Krüppel like factor,GKLF,KLF4)是近年來發(fā)現(xiàn)的一個鋅指轉(zhuǎn)錄因子。GKLF參與調(diào)控細胞生命活動的許多重要過程，如細胞增殖、分化等。在多種人類腫瘤中，GKLF發(fā)生異常表達，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的

2、聯(lián)系。我室先前利用cDNA微陣列分析發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子GKLF在食管鱗癌中表達下調(diào)，但其在食管癌中異常表達與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系目前尚無相關(guān)研究報道。用組織芯片的方法，檢測了95例食管鱗癌及其配對的正常食管上皮組織中GKLF蛋白的表達水平。結(jié)果表明：GKLF在食管鱗癌中表達明顯減低，并且其表達水平與食管癌分化程度相關(guān)。探討GKLF異常表達對食管癌分化影響的具體分子機制，發(fā)現(xiàn)GKLF能通過結(jié)合位于Keratin13基因轉(zhuǎn)錄起始位點上游-399

3、bp至-411bp之間的GKLF結(jié)合位點激活Keratin 13的轉(zhuǎn)錄表達。在食管癌組織和細胞系中，GKLF與Keratin 13的表達水平具有一定的相關(guān)性，不但進一步驗證了GKLF對Keratin 13的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，并且還提示GKLF可能在Keratin 13的表達調(diào)節(jié)中擔任著比較重要的角色。 結(jié)果揭示：GKLF可能通過調(diào)節(jié)一些食管上皮細胞中特異性分化相關(guān)基因的表達，而在食管上皮細胞由增殖進入分化狀態(tài)的正常程序中擔任著重要的角色

4、，其在食管鱗癌中的異常表達可能是導致細胞惡性轉(zhuǎn)化及異常分化的原因之一。 二.P53信號傳導通路在保持基因組穩(wěn)定性和防止細胞突變或癌變方面擔任重要的角色，并且可能與腫瘤的易感性會有著非常密切的關(guān)系。實驗探討P53和MDM2基因的兩個功能性單核苷酸多態(tài)，P53 72Arg>Pro和MDM2 309T>G，與食管鱗癌遺傳易感性之間的關(guān)系。我們應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)和限制性片段長度

5、多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)和ARMS-PCR以及DNA測序等分析方法，進行了包括758個食管癌病人和1420個正常對照的關(guān)聯(lián)研究，分析P53 72Arg>Pro和MDM2 309T>G基因型在病人和正常人中分布的差異以及這些基因型與食管癌風險的關(guān)系。 結(jié)果表明：攜帶P53 Pro/Pro基因型者發(fā)生食管癌的風險比攜P53 Arg/Arg基因型者高1.83倍

6、(95％CI，1.43-2.35；P<0.001)；攜帶MDM2 GG基因型者患食管癌的風險比攜帶MDM2 TT基因型者高1.49倍(95％CI，1.16-1.91：P=0.002)。而且，我們發(fā)現(xiàn)P53和MDM2基因的這兩個SNP之間有顯著的交互作用，既攜帶P53 Pro/Pro又攜帶MDM2 GG基因型的個體，發(fā)生食管癌的風險度比攜帶P53 Arg/Arg和MDM2 TT基因型的個體高3.10倍(95％CI，2.07-4.69)。這

7、種高于相乘的基因-基因交互作用表明這兩個危險因素處于導致疾病發(fā)生的同一條通路。并且這兩個多態(tài)導致食管癌風險增高與吸煙有協(xié)同作用，其中攜帶MDM2GG和P53 Pro/Pro基因型吸煙者發(fā)生食管癌風險最高(OR，5.29；95％CI，2.91-9.61)，是攜帶相應(yīng)基因型不吸煙者發(fā)生食管癌風險(OR，2.18；95％CI，1.18-4.01)的2到3倍。另外，我們還發(fā)現(xiàn)攜帶MDM2 GG基因型者患低分化進展期食管癌風險增高，MDM2GG基