安陽地區(qū)HPV感染和p53基因第72密碼子多態(tài)性及其突變與食管癌的相關(guān)研究.pdf

1、授予單位代碼學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)柮芗?jí)1045903341197公丌鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：作者姓名：學(xué)科門類：專業(yè)名稱：導(dǎo)州』姓名、職稱：安陽地區(qū)HPV感染和p53基因第72密碼J，多態(tài)性及其突變與食管癌的相關(guān)研究劉長軍醫(yī)學(xué)流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)段廣才教授2006年5月30日鄭州大學(xué)2006屆碩上學(xué)位論文中文摘要因素。但是，以往研究多是將患者癌組織與正常人群該位點(diǎn)的多態(tài)性分布相比較，而對(duì)于同一個(gè)體中，該位點(diǎn)在癌組織中與血液標(biāo)本中相比是否發(fā)生了

2、突變，鮮有報(bào)道。本研究旨在通過分析安陽地區(qū)HPV感染、p53第72密碼子多態(tài)性在食管癌患者中的分布情況，以及p53基因第4外顯子72密碼子的多態(tài)性在患者血液和癌組織標(biāo)本中是否有差異及其產(chǎn)生的可能原因，以探討該區(qū)食管癌發(fā)生與HPv感染和p53基因第72密碼子多態(tài)性及其突變之間關(guān)系，并為進(jìn)一步的該區(qū)食管癌病因和發(fā)生機(jī)制的研究提供依據(jù)。方法1標(biāo)本來源：癌組織取自安陽腫瘤醫(yī)院就診的食管癌患者新發(fā)病例手術(shù)切除標(biāo)本；血液為患者靜脈血，抗凝，與癌組織

3、一起于一80℃冰凍保存。一般資料采取問卷法在患者術(shù)前進(jìn)行。2基因組DNA的提?。?1)癌組織：取約20mg冰凍癌組織，用酚、氯仿法提取基因組DNA；(2)血液：取200u1全血細(xì)胞于15mlEp管中，用酚、氯仿法提取基因組DNA。3HPV的檢測(cè)：用上述提取的基因組DNA作模板，分別用針對(duì)HPV的晚期基因L1的通用引物GP5，6和針對(duì)HPVl6的E6基因的特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)HPvDNA。4p53基因第72密碼子的多態(tài)性

4、檢測(cè)：對(duì)提取的基因組DNA，采用PCR—RFLP(polymerasechainreaction—restrictionfragmentlengthp01ymorphism)法檢測(cè)血液和癌組織標(biāo)本中p53基因第72密碼子的多態(tài)性分布情況。5結(jié)果分析方法：對(duì)以上實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)輸入VisualFoxPr060建立數(shù)據(jù)庫，用SAS913統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。結(jié)果1在104例食管癌患者中HPV的檢出率分別是6058％(通用引物GP5／6)和4904