UVC照射誘導HeLa細胞凋亡過程中TIAR蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能研究.pdf

1、在本研究中，首先檢測了UVC照射對HeLa細胞中TIAR的蛋白質(zhì)表達水平及細胞內(nèi)定位的影響，結(jié)果證實TIAR的蛋白質(zhì)表達水平?jīng)]有顯著變化，但是UVC照射可以誘導TIAR部分地出核?！　榱搜芯縏IAR的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與細胞內(nèi)定位的關系，構(gòu)建了TIAR全長、N端及C端的EGFP融合蛋白表達載體并進行瞬式轉(zhuǎn)染，發(fā)現(xiàn)EGFP-TIARFL在細胞內(nèi)的分布與細胞免疫熒光的結(jié)果一致，即：正常情況下濃集于細胞核，中或高劑量UVC照射后部分的出核；E

2、GFP-TIARM123均勻的分布于細胞核和細胞漿，在高劑量UVC照射時幾乎全部出核?！　∵€對過表達TIAR缺失體的HeLa細胞進行UVC照射，檢測細胞凋亡情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定過表達EGFP-TIARRRM123抑制UVC照射誘導的HeLa細胞凋亡；而過表達EGFP-TIARQ-rich則促進UVC照射誘導的HeLa細胞凋亡。另外通過流式細胞儀對細胞周期分布進行分析，發(fā)現(xiàn)瞬時轉(zhuǎn)染過表達EGFP-TIARFL及EGFP-TIARRRM12

3、3促進細胞從G1向S及G2/M期的轉(zhuǎn)換，但是當UVC照射后卻反而抑制細胞從G1向S及G2/M期轉(zhuǎn)換；而過表達C端Q-rich結(jié)構(gòu)域則對細胞周期沒有顯著影響，UVC照射后的細胞周期變化也與轉(zhuǎn)染空載體的細胞相同?！　∫陨系难芯拷Y(jié)果表明：1)TIAR通過細胞內(nèi)定位的改變而非蛋白質(zhì)表達量的改變來參與UVC照射引起的細胞凋亡等效應；2)C端Q-rich結(jié)構(gòu)域?qū)τ赥IAR在正常情況下濃集于細胞核是必需的，并且妨礙UVC照射引起的TIAR的出核；3