高壓氧輔助抗毒血清干預(yù)對五步蛇毒中毒大鼠SVZ的影響.pdf

1、目的：
　　通過建立五步蛇毒大鼠中毒模型，觀察五步蛇毒對大鼠SVZ處Nestin基因及蛋白表達的影響，并探討HBO聯(lián)合抗毒血清干預(yù)對其的作用。
　　方法：
　　將96只健康成年雄性SD大鼠，隨機分為4組：對照組、蛇毒組、血清組、HBO+血清組，每組24只。經(jīng)尾靜脈注射五步蛇毒建立中毒模型，血清組于造模成功后立即尾靜脈注射抗毒血清，HBO+血清組于注射抗毒血清后0h、4h、11h、23h予以HBO治療一次，每個時間點各6

2、只，對照組不予任何處理。上述各組中的一部分大鼠分別于HBO治療結(jié)束后的相應(yīng)時間點（即注射抗毒血清后1h、5h、12h、24h）用生理鹽水及多聚甲醛經(jīng)左心室灌注固定腦組織，另一部分大鼠斷頭后立即冰上分離SVZ處組織，速凍備用，HE染色觀察腦組織病理變化，采用IHC、RT-PCR、Western-blot等檢測各組SVZ處Nestin mRNA及蛋白的表達變化。
　　結(jié)果：
　　1.腦組織病理變化：與對照組比較，蛇毒組SVZ處出

3、現(xiàn)明顯組織水腫，細胞數(shù)目減少，排列紊亂；經(jīng)抗毒血清和HBO干預(yù)后SVZ處組織水腫明顯減輕，細胞數(shù)增多，排列較規(guī)則；HBO聯(lián)合干預(yù)組病理變化改善更突出，且以注毒后5 h內(nèi)最明顯。
　　2. SVZ處Nestin基因及蛋白表達變化：Nestin蛋白在顱內(nèi)表達于NSCs胞漿。IHC結(jié)果提示對照組未見Nestin陽性細胞，蛇毒組僅有少許Nestin陽性表達細胞，抗毒血清和HBO干預(yù)后Nestin陽性細胞明顯增多，著色加深(P<0.05)。

4、相對定量結(jié)果顯示：與對照組比較，蛇毒組各時間點SVZ處Nestin mRNA和蛋白的表達量均明顯升高(P<0.05)；與蛇毒組相比，血清組、HBO+血清組Nestin mRNA和蛋白的表達量又進一步升高，注毒后1h、5h時差異顯著(P<0.05)，而在HBO+血清組其表達水平又顯著高于血清組(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.五步蛇毒可對腦組織造成神經(jīng)毒性損傷；
　　2.HBO聯(lián)合抗毒血清干預(yù)可對五步蛇毒中毒后腦損