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1、目的:通過(guò)觀察高壓氧(Hyperbaric oxygen,HBO)治療對(duì)大鼠脊髓損傷后誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)表達(dá)變化的影響,探討高壓氧對(duì)脊髓損傷的治療作用機(jī)制。
方法:雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,體重250~300g。隨機(jī)分為3組,A組(假手術(shù)組)椎板切除不損傷脊髓,B組及C組均采用改良Allen法制備大鼠脊髓不完全損傷模型,B組(實(shí)驗(yàn)組)術(shù)后8小時(shí)內(nèi)進(jìn)行高壓氧治療,治療時(shí)間共90分鐘;1
2、次/天,共五天,C組(對(duì)照組)術(shù)后不進(jìn)行任何處理。各組分別于損傷后不同時(shí)間點(diǎn)(8h、1d、2d、3d、5d、7d)進(jìn)行行為學(xué)觀察,運(yùn)動(dòng)功能綜合評(píng)分(BBB評(píng)分);隨后大鼠脊髓損傷部位取材,用蘇木精-伊紅(HE)染色法觀察損傷脊髓組織病理變化;用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)蛋白質(zhì)的表達(dá);并用RT-PCR檢測(cè)脊髓組織中iNOS-mRNA表達(dá)水平。
結(jié)果:1假手術(shù)組的評(píng)分為21分,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組與假手術(shù)組
3、比較,各時(shí)間點(diǎn)評(píng)分均明顯降低,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能有改善,BBB評(píng)分分值均明顯提高,差別有顯著意義(P<0.0.5)。2 HE染色鏡檢發(fā)現(xiàn)脊髓組織病理學(xué)改變實(shí)驗(yàn)組明顯輕于對(duì)照組。3實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組脊髓組織均發(fā)現(xiàn)iNOS表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞,可見于神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,均在第7天達(dá)到高峰,在各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞率比較,差異均有顯著性意義(P<0.0.5)。4 iNOS-mRNA表達(dá)于術(shù)后1d達(dá)高峰,實(shí)驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組(P<0.0
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