環(huán)孢素A對大鼠急性脊髓損傷后OMgp表達的影響.pdf

1、目的：
　　 1、探討脊髓損傷繼發(fā)性損害的機制；2、研究環(huán)孢素A對大鼠急性脊髓損傷后繼發(fā)性損害的保護作用。
　　 方法：采用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓損傷實驗動物模型。將成年SD大鼠隨機分為單純椎板切除陰性對照組(A組)、急性脊髓損傷組(B組)和急性脊髓損傷后小劑量環(huán)孢素A治療組(C組)，C組在損傷后早期從尾靜脈注射小劑量環(huán)孢素A治療。各組大鼠于損傷后1、7、14、28d應(yīng)用BBB評分評價神經(jīng)功能狀況；分別在術(shù)

2、后1、3、7、14d處死各組大鼠，分別取受損節(jié)段脊髓行HE染色及免疫組化染色觀察形態(tài)學變化；應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)(RealTime-PCR)方法觀察OMgp mRNA的表達；同時應(yīng)用Westenr-blot方法測定各組相應(yīng)時間點OMgp表達量。
　　 結(jié)果：
　　 1、神經(jīng)功能學BBB評分：與對照組相比，損傷組和治療組大鼠神經(jīng)功能明顯減退，損傷組功能減退最為顯著，治療組的BBB評分明顯優(yōu)于損傷組，差別具有統(tǒng)計學意義

3、。
　　 2、脊髓損傷區(qū)域的HE染色改變：光鏡下見損傷后1d時灰質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)片狀出血、中央?yún)^(qū)碎裂，軸突中斷及脫髓鞘改變；3d時神經(jīng)元腫脹，細胞核固縮，空洞形成，膠質(zhì)細胞減少；7d殘存神經(jīng)元數(shù)量減少，膠質(zhì)細胞增生，膠質(zhì)疤痕形成；14d脊髓損傷區(qū)出現(xiàn)囊腔樣變。
　　 3、免疫組織化學觀察：OMgp陽性反應(yīng)位于少質(zhì)膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元細胞膜，在大鼠急性損傷脊髓組織中，OMgp表達量明顯增加，對照組神經(jīng)元中有少量OMgp陽性表達，損傷后

4、OMgp的表達逐漸增高，損傷7d時OMgp表達明顯達到高峰，然后緩慢下降，至14d時表達仍高對照組。在小劑量CsA治療的大鼠急性損傷脊髓組織中各個時間點OMgp的表達量較損傷組明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4、Westem-bloting和RT-PCR檢測：在蛋白和mRNA水平OMgp表達趨勢一致，對照組可見OMgp mRNA和蛋白的少量表達，脊髓損傷后1d表達開始增加，7d時表達達到高峰，損傷組與治療組比