護理干預對大鼠脊髓損傷后運動功能修復的影響.pdf

1、研究背景:
　　脊髓損傷(Spinal cord injury SCI)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system CNS)的嚴重損傷,SCI后往往導致較嚴重的神經(jīng)功能缺損。而運動功能障礙是導致患者存活期喪失生活自理能力的最主要原因。SCI患者運動功能修復一直是醫(yī)患雙方關注的焦點,而運動功能訓練是臨床脊髓損傷患者運動功能康復的重要方法。已有的研究表明,脊髓損傷后臨床早期和持之以恒地進行運動功能護理干預可以促進脊髓

2、損傷患者運動功能部分恢復,但其機制仍不十分清楚,尚需更多基礎研究資料作為支撐。因此,本研究對脊髓損傷后大鼠進行運動功能護理干預,利用BBB評分(Basso,Beattie and Bresnahan score)和斜坡試驗(Inclined-plane score IP Score),肌電反應和肌濕重檢測,常規(guī)蘇木精-伊紅(Hematoxiline-eosin HE)染色,免疫組織化學(Immunohistochemistry IHC)

3、染色法等,評估了護理干預對脊髓損傷后大鼠雙后肢運動功能變化,腓腸肌電反應和肌濕重變化,光學顯微鏡觀察了脊髓損傷斷面的形態(tài)學變化,以期尋找護理干預在修復損傷脊髓的運動功能中的作用和支撐證據(jù)。
　　目的:
　　觀察護理干預對大鼠脊髓損傷后脊髓運動功能的恢復程度與變化,探討護理干預在修復損傷脊髓功能中的作用,為臨床護理提供循證依據(jù)。
　　材料和方法:
　　1.分組:將60只SD成年大鼠(約250g,雌雄不限)隨機分為A

4、組為正常對照組,B組為實驗對照組和 C組為實驗組三組(各組均為 n=20);B組和 C組又分為脊髓損傷后1d、7d、30d、60d四個時相點(各個時相點均為n=5)。
　　2.方法:
　　2.1大鼠脊髓損傷模型制備 B組和C組均采用切割加擠壓L4平面橫斷脊髓制備脊髓損傷大鼠模型。
　　2.2護理干預措施 A組大鼠為正常對照組,B組大鼠脊髓損傷后給予常規(guī)護理,C組大鼠脊髓損傷后給予護理干預。B組和 C組大鼠均于脊髓損傷后

5、1d開始進行腹腔注射青霉素鈉20萬U1次/d,連續(xù)注射3d以預防感染,協(xié)助受傷大鼠排尿、排便2次/d等常規(guī)護理;C組除常規(guī)護理之外,還給予按摩膀胱與腹部、關節(jié)活動度訓練和肌肉按摩訓練等被動運動訓練,護理干預均于損傷后立即進行,以后為2次/d,10min/次/只大鼠。大鼠后肢進行被動關節(jié)活動訓練,具體包括膝被動屈伸、膝被動外展內(nèi)收,髖被動屈伸、髖被動外展內(nèi)收,踝被動背屈跖屈訓練,以維持和改善其關節(jié)活動度;肌肉按壓訓練主要以向心性和環(huán)形交替

6、按摩足部、小腿、大腿各肌肉群以減少雙后肢水腫及增加血液循環(huán)。
　　2.3 BBB評分和斜坡試驗各組大鼠采用BBB評分法及斜坡試驗進行雙后肢運動功能評分,分別于脊髓損傷后1d、7d、30d和60d四個相同時相點檢測,評估護理干預后大鼠脊髓損傷的行為學變化。
　　2.4肌電反應和肌濕重檢測通過肌電反應和肌濕重檢測,觀察大鼠脊髓損傷后1d、7d、30d和60d腓腸肌的肌電反應和肌濕重變化,比較護理干預后大鼠脊髓損傷失神經(jīng)支配腓腸肌

7、的萎縮程度。
　　2.5常規(guī)HE染色采用組織學切片行HE染色,以觀察各組各個時相點脊髓損傷大鼠的組織修復情況。
　　2.6免疫組織化學染色法采用免疫組織化學法染色顯示各組脊髓損傷大鼠各個時相點的神經(jīng)絲蛋白-200(Neurofilament-200 NF-200)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein GFAP)的變化,觀察脊髓損傷后大鼠經(jīng)護理干預后在各組各時相點中神經(jīng)元的NF-2

8、00免疫反應陽性變化和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的GFAP免疫反應陽性變化。
　　主要結(jié)果:
　　第一部分:護理干預對大鼠脊髓損傷后脊髓運動功能修復的行為學影響
　　1.BBB評分和斜坡試驗結(jié)果顯示,在脊髓損傷后1d和7d時相點,實驗組與實驗對照組相比較,護理干預后 BBB評分和斜坡試驗無明顯差異(P>0.05);在脊髓損傷后30d和60d時相點,實驗組較實驗對照組高(P<0.05),實驗組大鼠后肢功能明顯改善,但實驗組和實驗對照組

9、得分低于正常對照組,均未達到正常水平。
　　2.腓腸肌電反應結(jié)果顯示,在脊髓損傷后30d和60d時相點,實驗組和實驗對照組出現(xiàn)肌纖顫電位,且實驗組較實驗對照組的腓腸肌纖顫電位波波幅增高(P<0.05),有統(tǒng)計學意義。
　　3.腓腸肌濕重稱量結(jié)果顯示,在脊髓損傷后60d時相點,實驗組和實驗對照組的腓腸肌濕重與正常對照組相比明顯減輕(P<0.01),實驗對照組與實驗組相比,實驗組腓腸肌濕重下降較實驗對照組輕(P<0.05),差異

10、有統(tǒng)計學意義。
　　第二部分:護理干預對大鼠脊髓損傷后脊髓運動功能修復的形態(tài)學影響
　　1. HE染色結(jié)果
　　脊髓損傷后1d,實驗組和實驗對照組 HE染色在脊髓損傷區(qū)均可見出血現(xiàn)象和輕度炎性反應,在損傷的腔隙內(nèi)可見組織碎片;脊髓損傷后7d,損傷區(qū)脊髓組織結(jié)構紊亂,大量炎性細胞浸潤,炎性反應加劇,也可見增生的各種細胞及增生的毛細血管,神經(jīng)元腫脹、壞死,突起消失;脊髓損傷后30d,實驗組和實驗對照組均可見脊髓損傷區(qū)炎性反

11、應減輕或消失,出現(xiàn)囊腔樣變化或空腔。組織填充處,細胞增生十分明顯,增生細胞有一定方向性,呈簇狀排列,增生的組織中見大量增生的毛細血管;脊髓損傷后60d,損傷部位脊髓組織結(jié)構改善,實驗組和實驗對照組無明顯區(qū)別,可見以損傷區(qū)域為中心形成的比較致密的組織圍繞在空腔周圍,組織細胞排列較有規(guī)律,走形與脊髓縱軸基本一致。
　　2.免疫組織化學染色結(jié)果
　　2.1 GFAP免疫組織化學染色結(jié)果顯示,正常對照組在脊髓灰質(zhì)中 GFAP陽性反應

12、細胞和陽性反應纖維清晰可見;在脊髓白質(zhì)中,GFAP免疫反應陽性細胞和陽性纖維密集,可見 GFAP免疫反應陽性細胞星狀突起明顯,細胞多呈不規(guī)則多角形。實驗組和實驗對照組中的 GFAP免疫反應陽性細胞表達隨時間的推移而逐漸增多,相同時相點GFAP免疫反應陽性未見明顯差異。脊髓損傷后1d,實驗對照組和實驗組脊髓損傷區(qū)組織結(jié)構紊亂,可見 GFAP免疫反應陽性的細胞和纖維,損傷腔隙內(nèi)的組織碎片中見GFAP免疫反應陽性細胞和陽性纖維。脊髓損傷后7d

13、,實驗對照組和實驗組損傷區(qū)可見散在 GFAP免疫反應陽性細胞和陽性纖維,染色較淺,見大量炎性細胞浸潤。脊髓損傷后30d,實驗對照組和實驗組損傷區(qū)內(nèi)組織 GFAP免疫反應陽性表達較7d時增加,GFAP免疫反應陽性細胞表達和GFAP陽性纖維表達增加,且GFAP免疫反應陽性纖維交織成網(wǎng)。脊髓損傷后60d,實驗對照組和實驗組脊髓損傷組織結(jié)構紊亂得到改善,損傷區(qū)內(nèi)組織填充,增生區(qū)內(nèi) GFAP免疫反應陽性細胞和陽性纖維明顯增加,染色加深呈棕褐色并形

14、成膠質(zhì)瘢痕,實驗組與實驗對照組比較無明顯差異。
　　2.2 NF-200免疫組織化學染色結(jié)果顯示,實驗對照組和實驗組 NF-200免疫反應陽性纖維均呈先下降,隨時間推移逐漸增高的趨勢;脊髓損傷后1d,實驗組與實驗對照組在脊髓損傷區(qū)組織中和損傷間隙內(nèi)的組織塊中見有 NF-200免疫反應陽性細胞和陽性纖維;脊髓損傷后7d,實驗組與實驗對照組在脊髓損傷組織中 NF-200免疫反應陽性細胞和纖維表達較脊髓損傷后1d明顯下降,見少量 NF-

15、200免疫反應陽性細胞和纖維分布;脊髓損傷后30d,實驗對照組與實驗組 NF-200免疫反應陽性表達隨時間推移逐漸增高;脊髓損傷后60d,實驗對照組與實驗組 NF-200免疫反應陽性纖維數(shù)量隨時間推移逐漸增加,在靠近正常脊髓側(cè) NF-200免疫反應陽性纖維交織成網(wǎng),在增生組織中可見少量NF-200免疫反應陽性纖維。
　　結(jié)果提示:
　　1.護理干預可延緩肌肉萎縮速度、改善運動功能,促進損傷脊髓功能的部分恢復。這可能與早期介入