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1、目的:探討SD雄性大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后應(yīng)用紅花注射液治療對(duì)神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。 方法: 1.采用改良A1len's WD法制作SCI模型。 2.成年80只SD雄性大鼠制備SCI模型后分為應(yīng)用紅花注射液干預(yù)的治療組(A組)和應(yīng)用生理鹽水干預(yù)的對(duì)照組(B組)并于損傷后6h、8h、1d、3d、7d、14d不同時(shí)間點(diǎn)取材。 3.HE染色觀察SCI后脊髓組織病理變化。
2、 4.術(shù)后6h測(cè)定脊髓組織中SOD和MDA含量。 5.免疫組化染色檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞胞漿中Cyt-c表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞的神經(jīng)細(xì)胞。 6.采用流式細(xì)胞儀磷脂結(jié)合蛋白V/碘化丙啶(AnnexinV/PI)雙標(biāo)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。7.Basso-Bearie.Bresnahan(BBB)運(yùn)動(dòng)評(píng)分術(shù)后動(dòng)物行為學(xué)觀察。 結(jié)果: 1.脊髓組織中MDA含量升高,SOD降低,A、B兩組比較有顯著差異(P<0.01)。 2.免
3、疫組化染色A、B兩組均發(fā)現(xiàn)調(diào)亡的神經(jīng)細(xì)胞以及胞漿中Cyt-C的陽(yáng)性表達(dá)(呈現(xiàn)棕褐色顆?;蚓鶆螯S染),Cyt-C表達(dá)的陽(yáng)性率在各時(shí)間點(diǎn)上均B組>A組(P<0.01)。 3.HE染色鏡檢發(fā)現(xiàn)SCI后脊髓組織病理學(xué)改變A組明顯輕于B組。 4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡百分率發(fā)現(xiàn)A組在不同時(shí)間點(diǎn)上均有效減少細(xì)胞凋亡,保護(hù)幸存細(xì)胞,與B組相比較具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),并在3d、7d時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡高峰處呈現(xiàn)顯著減少;
4、 5.BBB運(yùn)動(dòng)評(píng)分術(shù)后動(dòng)物行為學(xué)觀察顯示,脊髓損傷3d后與B組比較A組大鼠后肢的運(yùn)動(dòng)功能顯著增強(qiáng)(P<0.05),后肢反射的恢復(fù)加速。 結(jié)論: 1.紅花注射液能在SCI后早期有效清除自由基,A、B各組脊髓組織SOD、MDA變化有顯著性差異(P<0.01)。 2.紅花注射液可選擇性有效抑制Cyt-C的釋放,從而阻斷caspase級(jí)聯(lián)上游事件,減少脊髓神經(jīng)細(xì)胞損傷和凋亡,對(duì)神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用,促進(jìn)神經(jīng)功能的恢
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