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1、目的:探索SIRT1與大鼠脊髓損傷后炎癥因子,細(xì)胞凋亡及神經(jīng)功能恢復(fù)的關(guān)系。
方法:采用改良Allen's法,建立大鼠脊髓鈍挫傷模型(T10),112只SD大鼠被隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組(n=16只),模型組(n=32只),白藜蘆醇組(n=32只),對(duì)照劑組(n=32只)。脊髓損傷術(shù)后立即給予腹腔注射白藜蘆醇(resveratrol,RES),100mg/kg和聚乙二醇硬脂酸酯15(solutol HS 15,SOL),10
2、0mg/kg.進(jìn)行功能評(píng)分的大鼠術(shù)后每天給藥一次,連續(xù)1周。分別采用QT-PCR方法、ELISA方法、TUNEL熒光標(biāo)記法對(duì)4組(SHAM,RES,SOL,SCI)脊髓組織中各時(shí)間點(diǎn)SIRT1的表達(dá)活性、炎癥因子變化和細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)大鼠術(shù)前和術(shù)后1天,3天,1周,2周,3周,4周進(jìn)行BBB scores功能評(píng)分。
結(jié)果:所有引物都可以成功的擴(kuò)增出目的片段。RES組,SCI組和SOL組3組SIRT1的表達(dá)都有一定
3、升高,RES組SIRTI表達(dá)在4h明顯增加,在8h達(dá)到高峰,與其他兩組(SCI組,SOL組)比較在4h,24h,36h差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).除假手術(shù)組以外各組自8h后SIRT1表達(dá)下降。
SCI組大鼠損傷脊髓組織在損傷后4h各炎癥性細(xì)胞因子表達(dá)即明顯升高,其中TNF-α和IL-6于損傷后8h達(dá)峰值,IL-10在觀察時(shí)間內(nèi)呈持續(xù)性增高,IL-1β在24h達(dá)峰值。SOL組各炎癥因子的變化規(guī)律與SCI組基本一致,RE
4、S組與前兩組相比,濃度差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
與SHAM組相比,SCI組,RES組,SOL組術(shù)后1天凋亡細(xì)胞明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異性有意義(p<0.05)。在3天時(shí),SCI組,RES組,SOL組凋亡細(xì)胞數(shù)持續(xù)升高分別達(dá)到54.82,38.49,53.24,與其他兩組比較,RES組升高較低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),通過(guò)定位發(fā)現(xiàn),凋亡主要存在于神經(jīng)元。
術(shù)后1天除假手術(shù)組功能評(píng)分沒(méi)有明顯改
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