褪黑素對大鼠急性脊髓損傷后Nrf2-ARE信號通路的影響.pdf

1、背景與目的：
　　人體中樞神經(jīng)包括腦神經(jīng)和脊髓神經(jīng)，所有腦部的指令都需要通過脊髓神經(jīng)來傳達到身體各處。當脊髓受到損傷之后，身體會出現(xiàn)各種各樣的嚴重后果，諸如感覺障礙、運動障礙、大小便異常等情況，這會給個人帶來嚴重的痛苦和生活不便，并且更嚴重的損失和負擔會困擾社會和家庭。故而，對于脊髓損傷的研究一直是骨科研究的重點和難點。有數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示，全球每年大概有1150萬至5340萬人受到由于脊髓損傷引起的感覺障礙或者運動障礙的困擾。從分類上

2、來說，原發(fā)性脊髓損傷和繼發(fā)性脊髓損傷是脊髓損傷的兩個過程，兩者相互聯(lián)系又相互作用，共同導致了脊髓損傷的嚴重后果。其中，各種外力原因直接導致的脊柱和脊髓受損被稱為原發(fā)性脊髓損傷，這種損傷是在短時間內(nèi)不可逆。在原發(fā)性脊髓損傷后，發(fā)生的一系列炎性因子和細胞因子對脊髓神經(jīng)元細胞產(chǎn)生二次損傷，具有一定的可逆性。因此關(guān)于繼發(fā)性脊髓損傷的研究一直是熱點。褪黑素，又稱為松果體素，是由人體的松果體組織產(chǎn)生的一種胺類激素，不同學者的多種實驗證明，褪黑素能在

3、脊髓繼發(fā)性損傷中抑制炎癥反應，具有保護神經(jīng)的作用，但是其具體的作用機制尚不明確。Nrf2-ARE信號通路是今年來發(fā)現(xiàn)的一個信號傳導通路，與高血壓、惡性腫瘤、糖尿病等多種疾病都有很大的相關(guān)性。關(guān)于Nrf2-ARE信號通路和腦神經(jīng)損傷的相關(guān)研究，近年來偶見報道，但是與脊髓神經(jīng)損傷的關(guān)系鮮見報道，在褪黑素的影響下的Nrf2-ARE信號通路和脊髓損傷的研究更是尚未有人開展。本實驗旨在觀察褪黑素對大鼠急性脊髓損傷后脊髓組織中Nrf2-ARE信號通

4、路的激活情況，探討褪黑素在急性脊髓損傷后的作用機制。
　　材料與方法：
　　成年SD大鼠108只，按隨機數(shù)字表法分為對照組（A組）、損傷組（B組）及褪黑素組（C組），每組36只。損傷組和褪黑素組用改良的Allen's法建立T11-T12脊髓損傷模型，并分別在脊髓損傷后10 min腹腔注射等量MT溶劑和MT制劑。對照組僅行椎板切除，暴露T11-T12節(jié)段，不損傷脊髓神經(jīng)。各組分別于術(shù)后6 h、12 h、24 h隨機選取12只大

5、鼠處死，取T11-T12節(jié)段脊髓標本。HE染色法觀察脊髓損傷及炎性反應情況；免疫熒光法檢測血紅素氧化酶1(HO-1)、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化還原酶1(NQO-1)、紅系衍生的核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）蛋白的表達；RT-PCR法檢測大鼠脊髓組織HO-1、NQO-1、Nrf2 mRNA的表達。具體數(shù)據(jù)剖析應用SPSS20.0軟件進行。以P＜0.05體現(xiàn)各組之間差別具備統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　1、從脊髓HE染色切

6、片來看，對照組神經(jīng)元細胞形態(tài)正常，無水腫及壞死，無明顯出血點。損傷組出血灶明顯，炎性細胞增生明顯，部分神經(jīng)元水腫、壞死。褪黑素組出血灶較損傷組明顯減小，神經(jīng)元水腫亦較輕。
　　2、對照組的大鼠脊髓組織內(nèi)存在少量HO-1因子表達；損傷組 HO-1因子表達大量增加；褪黑素組脊髓損傷后HO-1因子表達比之于損傷組更高。
　　3、對照組的大鼠脊髓組織內(nèi)存在少量Nrf2因子表達；損傷組Nrf2因子表達大量增加；褪黑素組脊髓損傷后Nrf