積雪草酸對糖尿病大鼠腎臟Nrf2-ARE信號通路的影響.pdf

1、目的:觀察糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)大鼠經(jīng)積雪草酸(asiaticacid，AA)干預(yù)后，對Nrf2-ARE信號通路、腎臟組織轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforminggrowthfactor-betal，TGF-β1）及細胞外基質(zhì)的影響，探討其對抗糖尿病腎病的可能機制。
　　 方法:鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型，將糖尿病大鼠隨機分為5組:①糖尿病腎病組（

2、DN組）②低劑量AA組(AA1組)③中劑量AA組（AA2組）④高劑量AA組（AA3組）⑤α-硫辛酸(α-lipoicacid，α-LA)干預(yù)組（α-LA組），并以正常組(NC組)作對照。連續(xù)干預(yù)4、8及12周后觀察各組大鼠血糖(Bloodglucose，BG)、血尿素氮(bloodureanitrogen，BUN)、血肌酐(serumcreatinine，SCr)及尿白蛋白排泄率(urinaryalbuminexcrectionrate

3、，UAER);通過光鏡及電鏡下觀察腎臟在病理形態(tài)學(xué)上的改變;檢測大鼠腎臟皮質(zhì)中丙二醛(malondiadehyde，MDA)的含量及超氧化物岐化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性;通過Westernblot法對腎組織中NF-E2相關(guān)因子(Nrf-2)、血紅素氧合酶-1(HO-1)、TGF-β1、纖維連接蛋白(FN)、Ⅳ型膠原蛋白(Col-Ⅳ)的表達進行檢測。
　　 結(jié)果:
　　 1.4周、8周及1

4、2周末DN組大鼠BG、BUN、SCr及UAER與NC相比均顯著升高（均P＜0.05）;伴隨AA用量的逐漸升高，AA1組、AA2組、AA3組BUN、SCr、UAER都出現(xiàn)逐漸下降的趨勢;AA3組與α-LA干預(yù)組相比，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.光鏡顯示:8周末DN組出現(xiàn)腎小球的體積明顯增大，細胞外基質(zhì)出現(xiàn)增生，系膜細胞數(shù)量明顯增多;透射電鏡顯示:DN組的足突出現(xiàn)了增寬并同時伴有節(jié)段性的融合，腎小球基底膜顯示明顯增厚，系膜基質(zhì)增多;伴

5、隨AA劑量的上升，上述所觀察到的異常出現(xiàn)逐漸改善趨勢;4周末上述病理表現(xiàn)在DN組較輕，各治療組與DN組相比，無明顯改善;12周末上述病理表現(xiàn)在DN組進一步加重，各治療組與DN組相比，有改善趨勢。
　　 3.4周、8周及12周末，與NC相比，DN組大鼠MDA含量顯著升高(均P＜0.05)，SOD的活性顯著下降(P＜0.05);與DN組相比，隨著AA劑量的增加，AA1組、AA2組、AA3組MDA水平呈下降趨勢、SOD活性呈上升趨勢;

6、AA3組與α-LA干預(yù)組相比，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4.4周、8周及12周末，DN組大鼠Nrf2蛋白的表達增加，與同期NC組相比，差異有顯著性(P＜0.05);與DN組相比，隨著AA干預(yù)劑量的增加，AA1組、AA2組、AA3組Nrf2有上升趨勢。AA3組Nrf2蛋白的表達與α-LA干預(yù)組相比，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5.4周、8周及12周末，DN組大鼠HO-1蛋白的表達下降，與同期NC組相比，差異有顯著性(P＜0.05);

7、與DN組相比，隨著AA干預(yù)劑量的增加，AA1組、AA2組、AA3組HO-1有上升趨勢。AA3組HO-1蛋白的表達與α-LA干預(yù)組相比，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 6.4周、8周及12周末，DN組大鼠TGF-β1、FN、Col-Ⅳ蛋白的表達上升，與同期NC組相比，差異有顯著性(P＜0.05);與DN組相比，隨著AA干預(yù)劑量的增加，AA1組、AA2組、AA3組TGF-β1、FN、Col-Ⅳ有下降趨勢。AA3組HO-1蛋白的表達與α-LA干