Cullin4B和P16在人胃癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：探討Cullin4B和P16在人胃癌組織中的表達(dá)及其意義。
　　方法：隨機(jī)選取于2016年1月~2016年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院進(jìn)行胃癌切除術(shù)的胃癌患者25例，取其胃癌組織作為實(shí)驗(yàn)組，取相應(yīng)的癌旁正常組織作為對(duì)照組。應(yīng)用HE染色確定胃癌類型及其分化程度；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法及蛋白質(zhì)免疫印記（Western blot）檢測(cè)CUL4B蛋白及P16蛋白在胃癌組織及其對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織的表達(dá)情況及表達(dá)水平。分析兩者在胃癌組織及癌

2、旁正常組織中的表達(dá)差異及其與胃癌的臨床分期及臨床病理因素之間的聯(lián)系。
　　結(jié)果：
　　1.病例資料
　　HE染色，觀察所取的胃癌組織及癌旁正常組織的鏡下情況，胃癌類型：腺癌19例，粘液腺癌2例，印戒細(xì)胞癌3例，神經(jīng)內(nèi)分泌癌1例；分化程度：高分化3例，中分化9例，低分化13例；余病例資料如性別，年齡，臨床分期及臨床病理因素（見Table1）。
　　2.胃組織免疫組化結(jié)果
　　2.1.1 .CUL4B蛋白胃癌組

3、織及癌旁正常組織中的表達(dá)：根據(jù)免疫組化結(jié)果顯示CUL4B主要定位于細(xì)胞核，以細(xì)胞核中出現(xiàn)清晰的黃色、棕黃色至深棕色著色作為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。在胃癌組織中CUL4B大多呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，其光密度（OD）值為（0.180±0.019），癌旁正常組織大多呈陰性、弱陽(yáng)性或陽(yáng)性表達(dá)，其OD值為（0.128±0.012），胃癌組織的OD值明顯高于癌旁正常組織，兩者差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　2.1.2 .CUL4B蛋白與胃癌臨

4、床分期：CUL4B蛋白在胃癌組織中大多呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，其I期OD值為（0.160±0.011）、II期OD值為（0.176±0.015）、III期+Ⅳ期的OD值為（0.191±0.016），I期與II期的之間比較的P值為0.200，兩者差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.021，兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.260，兩者差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

5、義（P>0.05）；
　　2.1.3. CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素：分化程度:高+中分化組胃癌組織中CUL4B蛋白表達(dá)水平的OD值為（0.162±0.009）低于低分化組的OD值（0.192±0.013），兩組間CUL4B蛋白表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腫瘤浸潤(rùn)深度（T分期）：（T1+T2）組CUL4B蛋白表達(dá)水平的OD值為（0.164±0.012）明顯低于（T3+T4）組OD值（0.191±0.016）

6、，組間CUL4B蛋白表達(dá)水平差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.2.1 .P16蛋白胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)：P16蛋白染色主要位于細(xì)胞核。在胃癌組織中P16蛋白大多呈陰性、弱陽(yáng)性表達(dá)，少數(shù)呈陽(yáng)性表達(dá)，其光密度（OD）值為（0.112±0.017），癌旁正常組織大多中呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，其OD值為（0.151±0.012），胃癌

7、組織的OD值明顯低于癌旁正常組織，兩者間差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　2.2.2. P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期：P16蛋白在胃癌組織中大多呈陰性或弱陽(yáng)性表達(dá)，I期OD值為（0.129±0.009）、II期OD值為（0.120±0.006）、在III期+Ⅳ期胃癌組織中的表達(dá)較I期及II期的表達(dá)水平低，其OD值為（0.100±0.015），I期與II期間比較的P值為0.229，兩者間的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.0

8、5）；I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.018，兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；II期與III期+Ⅳ期比較間的P值為0.026，兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；
　　2.2.3 .P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素：分化程度:高+中分化組胃癌組織P16蛋白表達(dá)水平的OD值為（0.126±0.011）高于低分化組的OD值（0.102±0.016），兩組間P16蛋白表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腫

9、瘤浸潤(rùn)深度（T分期）：（T1+T2）組P16蛋白表達(dá)水平的OD值為（0.126±0.009）高于（T3+T4）組OD值（0.100±0.015），組間P16蛋白表達(dá)水平差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　2.3. CUL4B和P16表達(dá)蛋白在胃癌組織中的相關(guān)性：應(yīng)用直線回歸的統(tǒng)計(jì)方法分析應(yīng)用免疫組化學(xué)法檢測(cè)的CUL4B蛋白及P16蛋白在胃

10、癌組織中表達(dá)水平的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.552, P<0.05）。
　　3.胃組織Western blot結(jié)果
　　3.1.1.應(yīng)用Western blot檢測(cè)CUL4B蛋白的表達(dá)：檢測(cè)CUL4B蛋白在胃組織中的表達(dá)，胃癌組織為（0.734±0.150），癌旁正常組織為（0.374±0.052），胃癌組織CUL4B蛋白的表達(dá)量明顯高于癌旁正常組織，差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　3.

11、1.2. CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期：I期為（0.577±0.035）、II期為（0.642±0.025）、III期+Ⅳ期為（0.860±0.099），I期與II期之間比較的P值為0.061，兩者間表達(dá)量的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.000，兩者間表達(dá)量的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.002，兩者間表達(dá)量的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

12、P<0.01）；
　　3.1.3. CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素：分化程度:高+中分化組中CUL4B蛋白為（0.614±0.070）低于低分化組的（0.820±0.131），兩組間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腫瘤浸潤(rùn)深度（T分期）：（T1+T2）組CUL4B蛋白為（0.609±0.045）低于（T3+T4）組（0.860±0.099），組間CUL4B蛋白表達(dá)量差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而患者的

13、性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　3.2.1.應(yīng)用Western blot檢測(cè)P16蛋白在胃組織中的表達(dá)：胃癌組織為（0.553±0.096），癌旁正常組織為（0.894±0.187），胃癌組織P16蛋白的表達(dá)量明顯低于癌旁正常組織，兩組間P16蛋白的表達(dá)量的差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　3.2.2 .P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期：I期為（0.643±0.042

14、）、II期為（0.601±0.069）、III期+Ⅳ期為（0.484±0.075），I期與II期之間比較的P值為0.411，兩者間表達(dá)量的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.012，兩者間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.059，兩者間表達(dá)量的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；
　　3.2.3. P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素：分化

15、程度:高+中分化組中P16蛋白為（0.629±0.054）高于低分化組的（0.498±0.082），兩組間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；腫瘤浸潤(rùn)深度（T分期）：（T1+T2）組P16蛋白表達(dá)為（0.621±0.056）高于（T3+T4）組的（0.484±0.075），兩組間P16蛋白表達(dá)量差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　

16、3.3.胃癌組織中CUL4B蛋白和p16蛋白表達(dá)量的相關(guān)性：應(yīng)用直線回歸的統(tǒng)計(jì)方法分析應(yīng)用Western blot檢測(cè)的CUL4B蛋白及P16蛋白在胃癌組織中表達(dá)量間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平間也呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.667, P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.CUL4B蛋白在胃癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織，與胃癌的臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度呈正相關(guān)，提示其參與了胃癌的惡性轉(zhuǎn)化過程，CUL4B在胃癌細(xì)胞中高表達(dá)，說