載脂蛋白E對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶--9表達(dá)的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討載脂蛋白E(ApoE)對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)的作用及機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)C57BL/6J種屬的ApoE基因敲除型(ApoE-/-)和野生型(WT)乳鼠的星形膠質(zhì)細(xì)胞。用抗星形膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Anti astrocyteacidic protein，GFAP)抗體鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞純度，用抗MMP-9抗體檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞以確定其定性表達(dá)MMP-9。將ApoE-/-和WT的星形膠質(zhì)細(xì)胞分別分

2、為對(duì)照組、活化組、抗體組（分為“活化組+抗TNF-α”、“活化組+抗IL-12”、“活化組+抗IL-6”和“活化組+抗IFN-γ），對(duì)照組不進(jìn)行任何干預(yù)，活化組加百日咳毒素(PTX)、熱滅活的結(jié)核分枝桿菌H37Ra刺激，在活化組的基礎(chǔ)上設(shè)置抗體組，抗體組為4種不同處理，分別加入抗TNF-α、IL-12、IL-6、IFN-γ抗體，以抑制其相應(yīng)的炎癥因子。用ELISA方法檢測對(duì)照組、活化組及抗體組的4個(gè)亞組中MMP-9、TIMP-1濃度，以

3、確定活化組相對(duì)于對(duì)照組、抗體組的4個(gè)亞組相對(duì)于活化組的MMP-9和TIMP-1濃度變化情況;接著檢測三組培養(yǎng)液中TNF-α、IL-12、IL-6、IFN-γ炎癥因子的濃度，其中抗體組根據(jù)加入不同抗體的情況，只對(duì)抗體對(duì)應(yīng)的炎癥因子進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果： ApoE-/-和WT的星形膠質(zhì)細(xì)胞均定性表達(dá)MMP-9。ApoE-/-和WT的星形膠質(zhì)細(xì)胞活化組相對(duì)于對(duì)應(yīng)對(duì)照組MMP-9的濃度明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，抗體組中的

4、4個(gè)亞組相對(duì)于活化組則明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而TIMP-1的濃度分別在ApoE-/-和WT的星形膠質(zhì)細(xì)胞各種情況之間沒有明顯差異，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); ApoE-/-和WT的星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化組相對(duì)于對(duì)照組炎癥因子濃度明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而加入抗體干預(yù)后的4個(gè)亞組，抗體組的4個(gè)亞組相對(duì)于活化組其對(duì)應(yīng)的炎癥因子濃度均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，ApoE-/-乳鼠的