基于PI3K-Akt信號(hào)通路研究大黃附子湯加減治療慢性腎衰竭大鼠的機(jī)制.pdf

1、目的:
　　通過(guò)觀察大黃附子湯加減對(duì)慢性腎衰竭(CRF)大鼠腎功能、腎臟病理形態(tài)改變及對(duì)PI3K/Akt信號(hào)通路的影響，探討該方治療CRF的機(jī)制。
　　方法:
　　①造模及分組:將60只7周齡清潔級(jí)，體重在180-220g之間的雄性Wistar大鼠，隨機(jī)分成五組每組12只，分別命名為空白組、假手術(shù)組、模型組、對(duì)照組、治療組。對(duì)模型組、對(duì)照組與治療組的大鼠，采用5/6腎切除手術(shù)的方式建立動(dòng)物模型，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后行第一次

2、手術(shù)，在水合氯醛的麻醉下切除大鼠左腎2/3的腎組織。一周后進(jìn)行第二次手術(shù)，切除大鼠右側(cè)腎組織;假手術(shù)組的大鼠只剝除兩腎的被膜;空白組不做處理。
　　②治療給藥:造模完成后繼續(xù)喂養(yǎng)4周，4周后每天上午對(duì)每組大鼠使用不同的藥物灌胃(10ml/Kg·d):空白組、模型組和假手術(shù)組大鼠使用蒸餾水灌胃;對(duì)照組使用尿毒清顆粒溶液灌胃;治療組用大黃附子湯加減灌胃，連續(xù)灌胃8周。
　　③指標(biāo)檢測(cè):給藥后8周后，在麻醉下經(jīng)大鼠腹主動(dòng)脈采集大鼠

3、血液，用于檢測(cè)大鼠血常規(guī)、腎功能;采血完畢后探取大鼠腎臟，將殘余腎組織分割為兩部分，一部分腎組織置于凍存管中，以便用Western blot法檢測(cè)組織中磷酸化Akt(p-Akt)、總Akt(pan Akt)的蛋白含量，另一部分腎組織存放于多聚甲醛中，經(jīng)處理后用光鏡觀察各組腎組織的病理情況并采集圖片以對(duì)比各組變化。
　　結(jié)果:
　?、倌Ｐ徒M、對(duì)照組和治療組與空白組、假手術(shù)組對(duì)比，RBC、Hb的含量顯著降低，血清SCr、BUN的

4、含量顯著升高，腎組織中p-Akt/pan Akt比值顯著升高，各組對(duì)比差異明顯(P＜0.05)，光鏡下腎間質(zhì)纖維化明顯;②對(duì)照組和治療組與模型組對(duì)比，RBC、Hb的含量顯著升高，SCr、BUN的含量顯著降低，腎組織中p-Akt/pan Akt比值顯著降低，各組對(duì)比差異明顯(P＜0.05)，光鏡下腎纖維化程度較模型組減輕。③治療組與對(duì)照組對(duì)比，RBC、Hb的含量顯著升高，SCr、BUN的含量顯著降低，腎組織中p-Akt/panAkt比值顯