殼聚糖-類人膠原蛋白海綿的生物相容性及止血效果研究.pdf

1、膠原蛋白是臨床常用的止血材料，其可通過誘導(dǎo)血小板聚集、促進(jìn)血栓凝塊形成及激活凝血系統(tǒng)等方面起到止血效果。殼聚糖是目前醫(yī)療領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的一種安全可靠的醫(yī)用高分子材料，具有優(yōu)良的生物親和性和力學(xué)特性。本實(shí)驗(yàn)室通過重組大腸桿菌BL 21高密度發(fā)酵的工藝生產(chǎn)了類人膠原蛋白。然后，以類人膠原蛋白為主要原料，再復(fù)合以特定的生物多糖，通過冷凍干燥技術(shù)制成殼聚糖.類人膠原蛋白海綿。我們通過細(xì)胞及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以期證實(shí)：殼聚糖.類人膠原蛋白海綿由于同時(shí)具備類人

2、膠原蛋白和殼聚糖的生物學(xué)特性，因此其止血效果優(yōu)于目前臨床常用的止血材料，如：明膠海綿。并且具有以往動(dòng)物源性膠原材料更好的生物相容性。 本研究首先對(duì)殼聚糖.類人膠原蛋白止血海綿的理化性質(zhì)進(jìn)行觀察，其內(nèi)部孔徑大約為100~250 m，孔隙率達(dá)到90％以上，吸水率約為3100％，密度0.043g/cm3，灰分<0.1％，在生理鹽水中8周內(nèi)形態(tài)完整，不破損分散，具有良好的理化性質(zhì)。對(duì)殼聚糖.類人膠原蛋白進(jìn)行的生物相容性實(shí)驗(yàn)研究內(nèi)容包括：

3、血液相容性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、致敏實(shí)驗(yàn)、局部刺激實(shí)驗(yàn)、肝臟植埋實(shí)驗(yàn)、降解實(shí)驗(yàn)和致癌實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：①殼聚糖一類人膠原蛋白海綿不引起明顯溶血反應(yīng)、對(duì)血液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的功能無明顯影響，其具有良好的血液相容性；②通過細(xì)胞形態(tài)法和MTT比色法觀察評(píng)定，殼聚糖-類人膠原蛋白海綿對(duì)人成纖維細(xì)胞的形態(tài)和生長不構(gòu)成明顯的損害；⑨殼聚糖.類人膠原蛋白海綿對(duì)豚鼠皮膚不產(chǎn)生致敏反應(yīng)、對(duì)兔皮膚無明顯刺激性；④殼聚糖-類人膠原蛋白海綿與明膠海綿

4、比較，植入大鼠肝臟15天后，通過光鏡及透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，明膠海綿可引起肝臟組織更嚴(yán)重的組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)改變；⑤殼聚糖-類人膠原蛋白海綿的體內(nèi)降解率與目前臨床使用止血材料無明顯差異；⑥皮下埋置殼聚糖-類人膠原蛋白海綿對(duì)兔無明顯致癌性和無明顯血液、肝功能、腎功能方面毒性作用。因此，對(duì)殼聚糖.類人膠原蛋白進(jìn)行的生物相容性研究發(fā)現(xiàn)，其具有良好的組織相容性和血液相容性。 本研究進(jìn)一步對(duì)殼聚糖-類人膠原蛋白海綿在兔肝臟創(chuàng)面的止血效果進(jìn)行了研究