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1、植物內(nèi)生真菌是指在生活史中的某一個(gè)階段存在于健康植物組織內(nèi)部,不會(huì)引起宿主明顯病癥或者對(duì)宿主造成明顯傷害的真菌。
丹參是雙子葉植物唇形科鼠尾草屬多年生直立草本植物,是一種常用的藥用植物,具有活血祛瘀,通經(jīng)止痛,清心除煩,涼血消癰之功效;三尖杉是一種常綠喬木,亞熱帶特有植物,產(chǎn)于浙江、安徽南部、福建、江西、湖南等省區(qū),具有驅(qū)蟲(chóng),消積,抗癌的功能,用于治療咳嗽,食積,蛔蟲(chóng)、鉤蟲(chóng)病。而次生代謝產(chǎn)物是指某些微生物生長(zhǎng)到穩(wěn)定期前后,以結(jié)
2、構(gòu)簡(jiǎn)單、代謝途徑明確、產(chǎn)量較大的初生代謝物為前體,通過(guò)復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化合物。目前大量的研究表明內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物種類(lèi)豐富、結(jié)構(gòu)新穎、生物活性多樣,是一座為人類(lèi)提供生物活性物質(zhì)的寶庫(kù)。本課題組致力于藥用植物內(nèi)生真菌生物多樣性、化學(xué)多樣性和宿主相關(guān)性的研究。在前期研究中,課題組從丹參和三尖杉中分別分離并鑒定出了深綠木霉菌,分別編號(hào)為D16和S361,其中D16能產(chǎn)生丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA,而在S361次生代謝產(chǎn)物中
3、并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)丹參酮類(lèi)的物質(zhì)。查閱文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn),有報(bào)道顯示在不同宿主中生長(zhǎng)的其它屬的同種內(nèi)生真菌能產(chǎn)生和宿主活性成分類(lèi)似的次生代謝產(chǎn)物,猜想在D16和S361的次生代謝產(chǎn)物中是否也會(huì)出現(xiàn)類(lèi)似的現(xiàn)象。
本文對(duì)分離自浙江省建德市三尖杉的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride S361)和分離自陜西商洛丹參的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride D16)進(jìn)行了系統(tǒng)的次生代謝產(chǎn)物及其生物學(xué)活性研究。
4、
采用大米培養(yǎng)基對(duì)D16菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),采用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等方法對(duì)其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離純化,采用各種波譜數(shù)據(jù)(NMR,MS,IR,CD)以及文獻(xiàn)對(duì)照等手段進(jìn)行鑒定,共分離鑒定化合物17個(gè),包括3個(gè)新化合物(3個(gè)倍半萜類(lèi)的化合物)和14個(gè)已知化合物(包括了5個(gè)酯類(lèi)化合物,2個(gè)酸類(lèi)化合物,1個(gè)酚類(lèi)化合物,1個(gè)醇類(lèi)化合物,1個(gè)酮類(lèi)化合物,3個(gè)倍半
5、萜的化合物,1個(gè)二萜類(lèi)化合物)。
采用大米培養(yǎng)基對(duì)S361菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),采用硅膠柱色譜、OD柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜儀等方法對(duì)其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離純化,采用各種波譜數(shù)據(jù)(NMR,MS,IR,CD)以及文獻(xiàn)對(duì)照等手段進(jìn)行鑒定,共分離鑒定化合物16個(gè),包括4個(gè)新化合物(2個(gè)酰胺類(lèi)的化合物,1個(gè)倍半萜類(lèi)的化合物,1個(gè)二萜類(lèi)的化合物)和12個(gè)已知化合物(包括了3個(gè)內(nèi)脂類(lèi)的化
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