喜樹幼苗次生代謝產(chǎn)物對光強(qiáng)的響應(yīng).pdf

1、喜樹(Camptothecaacuminata)是我國特有樹種，所含喜樹堿(camptothecin，CPT)為具有抗癌活性的單萜吲哚生物堿。在對喜樹幼苗進(jìn)行光強(qiáng)處理實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用高效液相色譜法測定喜樹幼苗根、莖和葉片次生代謝產(chǎn)物，分析了喜樹幼苗各組織次生代謝產(chǎn)物的季節(jié)變化及對光強(qiáng)的響應(yīng)規(guī)律，以及喜樹堿與其它次生代謝產(chǎn)物間的相關(guān)性。主要結(jié)果如下： (1)建立了一種簡便、可靠的測定喜樹次生代謝產(chǎn)物的高效液相色譜分析方法：英國H

2、ypersilGOLDC18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)，進(jìn)樣量20μL，流速1mL/min。梯度洗脫程序分4個階段線性提高甲醇-2％乙酸/水(v/v)體系中的甲醇比例，最初30min由5％增至30％，至第70、80、85min時分別達(dá)到50％、80％、100％。樣品提取方法為，0.25g喜樹樣品以甲醇超聲提取30min，定容至5mL。應(yīng)用上述方法從喜樹種子和喜樹幼苗根、莖、葉片中共測定出24種次生代謝產(chǎn)物(編號為1至24號

3、，喜樹堿為16號)，但器官之間存在差異。 (2)喜樹幼苗根的次生代謝產(chǎn)物隨生育期的變化較葉片明顯，莖的次生代謝產(chǎn)物變化最小。除20號外的次生代謝產(chǎn)物均隨幼苗的生長而呈減少的趨勢，根中的20號化合物從8月27日開始明顯增多。75天的觀測期(7月13日至9月26日)內(nèi)，根次生代謝產(chǎn)物的差異在7月28日與8月27日最為明顯，莖則是7月28日與9月26日差異較大，葉片次生代謝產(chǎn)物在8月12日及8月27日均與9月26日的整體差異較大。次生

4、代謝產(chǎn)物在各器官中的分配比例也隨著喜樹幼苗的生長而變化，但喜樹堿以及2、3、7、8、11、15和17號化合物在葉片中分配的最多，而10號化合物在根中的比例最高、葉片的次之。7月28日時24號化合物在葉片中的比例最高，8月12日至9月26日則是在根中分配的最多。 (3)喜樹幼苗葉片次生代謝產(chǎn)物對光強(qiáng)變化的響應(yīng)程度最大，根次之，莖最小。與全光照的相比，相對光強(qiáng)為30％處理15天、45天、60天和75天時根次生代謝產(chǎn)物的變化較明顯，光

5、強(qiáng)為全光照的60％處理30天時受到的影響較相對光強(qiáng)為30％的大。莖則是相對光強(qiáng)為60％處理15的與全光照的差異較大，而相對光強(qiáng)為30％處理30天的較全光照的變化明顯，處理45天以后光強(qiáng)對莖次生代謝產(chǎn)物基本沒有影響。長期的遮蔭處理(60天和75天)對喜樹幼苗根和葉片次生代謝產(chǎn)物的影響大。 在相對光強(qiáng)為60％的條件下，處理15天和75天的喜樹幼苗葉片喜樹堿含量分別是全光照的1.2倍和1.8倍，處理60天的莖喜樹堿含量也明顯高于全光照

6、的。相對光強(qiáng)為30％時不利于喜樹堿在葉片和莖中積累，而處理45天的根喜樹堿含量卻是全光照的2倍。光強(qiáng)也不同程度地影響喜樹幼苗各器官中其它次生代謝產(chǎn)物的積累，但未觀察到規(guī)律。 光強(qiáng)還影響喜樹幼苗次生代謝產(chǎn)物在各器官中的分配，也無規(guī)律可循。 (4)喜樹幼苗根中喜樹堿與19和24號化合物的相關(guān)系數(shù)較高，而莖中的卻與2和10號化合物的相關(guān)關(guān)系最好，葉片中的喜樹堿與大部分次生代謝產(chǎn)物之間呈乘冪相關(guān)關(guān)系，其中與3號化合物的相關(guān)系數(shù)最