光動力治療對尖銳濕疣患者免疫系統(tǒng)影響的初步研究.pdf

1、目的：
　　1.了解杭州地區(qū)尖銳濕疣患者人乳頭瘤病毒基因型(HPV)的分布情況。
　　2.探討尖銳濕疣(CA)患者免疫功能的狀況以及光動力治療對其免疫系統(tǒng)的影響作用。
　　方法：
　　1.應(yīng)用PCR-反向斑點雜交試驗檢測杭州地區(qū)190例尖銳濕疣患者宮頸和/或外陰、肛周、尿道口的人乳頭瘤病毒基因型。
　　2.應(yīng)用流式細胞儀檢測36例尖銳濕疣患者（其中23例經(jīng)3次ALA-PDT治療后再次進行檢測）及24例健康對

2、照人群的T細胞亞群，33例尖銳濕疣患者（其中25例經(jīng)3次ALA-PDT治療后再次進行檢測）及26例健康對照者外周血中CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的百分比;采用免疫組化的方法檢測10例尖銳濕疣患者（其中7例經(jīng)3次ALA-PDT治療后再次取材檢測）皮損中CD4，CD8，F(xiàn)OXP3，PD-1，PD-L1，CCL20，E-cadherin的表達情況。應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　結(jié)果：
　　1.19

3、0例尖銳濕疣患者，共檢測224個部位（34例同時檢測2個部位）。其中150例(78.95％)包括173處(77.23％)檢測到HPV陽性。107處為單一感染(61.85％)，66處多重感染(38.15％)。尿道口皮損的陽性檢出率較低，與其他部位相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。單一低危型HPV在宮頸陽性患者中的檢出率明顯低于尿道口陽性患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。120例宮頸檢測的患者，其外陰均可見CA皮損。其中10例患者

4、同時存在宮頸肉眼可見的疣體，另110例宮頸無肉眼可見疣體的患者中85例(77.27％) HPV陽性。HPV基因型檢出率從高到低依次為HPV-6(61，21.86％)、11(55，19.71％)、16(36，12.90％)、52(20,7.17％)、18(17,6.09％)、58(16,5.73％)、53和CP8304(14,5.02％),其余的12種基因型檢出次數(shù)均小于10，HPV-35未檢測到。宮頸部位HPV-6檢出率明顯低于肛周，H

5、PV-11明顯低于尿道口，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。宮頸高危型HPV檢出率明顯高于尿道口，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而與其他部位相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.外周血T細胞亞群檢測顯示CA患者治療前CD4+T細胞的百分比明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，治療后百分比增加，與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。CA治療后CD8+T細胞百分比較治療前下降，略高于健康對照組

6、，三者之間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。CA患者治療前CD4/CD8比值明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，經(jīng)ALA-PDT治療后CD4/CD8比值增高，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。治療后CD4/CD8比值雖然仍低于健康對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　CA組患者ALA-PDT治療前和治療后外周血中CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞占CD4+CD25+T細胞的百

7、分比均明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與治療前相比，治療后CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的百分比增高，但兩者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。25例CA患者ALA-PDT治療3次后予以隨訪3個月，其中8例患者皮疹復(fù)發(fā)，17例皮疹未復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)組CA患者CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞比未復(fù)發(fā)組患者高，兩者之間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.CA患者治療前的皮損組織中CD

8、4陽性表達高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);CD8陽性表達亦高于正常對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);CD4/CD8比值較正常對照組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。經(jīng)3次ALA-PDT治療后CA皮損中CD4和CD8的陽性表達較治療前有所下調(diào)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。然而CD4/CD8比值有明顯增加，與治療前相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.0

9、5)。治療后CCL20的表達明顯上調(diào)，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。Foxp3、PD-1、PD-L1及E-cadherin的表達在CA皮損治療前后及與正常對照皮膚比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.杭州地區(qū)CA患者HPV檢出率高達77.23％。HPV感染形式包括單一感染和多重感染（2～6種基因型），以前者為主。CA患者可出現(xiàn)多部位如宮頸外陰HPV基因型交叉感染。宮頸無疣體的女性CA患

10、者中宮頸HPV感染率高達77.27％，因此無論是否伴有宮頸皮損，均應(yīng)常規(guī)進行宮頸HPV的檢測和隨訪，并積極治療。
　　2.CA患者治療前外周血中CD4+T細胞百分比和CD4/CD8比值低于健康對照組，CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞百分比高于健康對照組;皮損組織中CD4表達高于健康對照組，但CD4/CD8比值低于健康對照組。提示患者存在免疫功能異常，處于免疫失衡狀態(tài)。ALA-PDT治療后外周血及皮損組織中CD4/CD8比